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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> 人小腸平滑肌細(xì)胞
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產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-10-19 10:16:35瀏覽次數(shù):127次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線人胃MatchPair™:胃壁細(xì)胞和胃腫瘤原代細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
人小腸平滑肌細(xì)胞 | 5×105 | XG-X6383 |
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細(xì)胞懸浮生長。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
公司產(chǎn)品采用干冰運輸,經(jīng)過逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時停止其生命活動,保存其活性,使您的實驗更生動,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.
NA水基液體顆粒計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- API5 antibody人Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒
2-Ami,3-propanediol油基單分散球形顆粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- APIP antibody人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒
2-AMino-2-Methyl-1-propanol;IsobutanolaMine;2-AMinoisobutanol;AMP油基單分散球形顆粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- APLF antibody人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒
2-Amino-5-methylbenzoic acid油基單分散球形顆粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- APLNR antibody人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒
J acid油基單分散球形顆粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- APLP1 antibodyA(IgA)ELISA試劑盒
2-Amino-5-bromo-3-methylpyridine油基單分散球形顆粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- APLP2 antibodyG(IgG)ELISA試劑盒
2-Amino-5-bromobenzoic acid油基單分散球形顆粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- APOA1 antibodyM(IgM)ELISA試劑盒
2-Amino-5-bromopyridine油基單分散球形顆粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- APOA4 antibody人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
人小腸平滑肌細(xì)胞Human Ras-GAP1 (Rac-GTPase Activating Protein 1) ELISA Kit 周期素A1蛋白抗體anti- PNMT antibody原片段F1+2(F1+2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human GAS (N-Acetylgalactosamine 6-Sulfatase) ELISA Kit 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白3抗體anti- PNO1 antibodyⅠ型前膠原(PCⅠ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human PTPRO (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type O) ELISA Kit 細(xì)胞因子誘導(dǎo)凋亡抑制因子1anti- PNPLA3 antibodyWAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human P27 (P27 Protein) ELISA Kit細(xì)胞分裂周期蛋白2亞型1抗體anti- PNPLA6 antibody補體因子D(CFD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human TP53 (Tumor Protein p53) ELISA Kit8號染色體開放閱讀框34抗體anti- PNPO antibody白介素3(IL3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human PDAP1 (Pdgfa Associated Protein 1) ELISA KitM鈣粘附分子抗體anti- PNPT1 antibody白介素3(IL3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human PDCN (Podocin) ELISA Kit著絲粒蛋白B抗體anti- PNRC1 antibody白介素4(IL4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human Preptin ELISA Kit促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素結(jié)合蛋白抗體anti- PODN antibody白介素4(IL4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
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