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產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 人角膜上皮細胞 |
規(guī)格 | 5×105 |
貨號 | XG-X6440 |
培養(yǎng)步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
D(+)-Glucose標準品anti- BPHL antibody人龍(PS)ELISA試劑盒
NA標準品anti- BPI antibody人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒
D-Glucose-6-phosphate disodium salt標準品anti- BPIL1 antibody人紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒
Tri-O-acetyl-D-glucal磺胺鄰二氧嘧啶標準品-磺胺多辛anti- BPNT1 antibody人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒
NA磺胺間二氧嘧啶標準品anti- Brachyury-T antibody人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒
D-Aspartic acid鹽酸環(huán)沙星一水合物標準品anti- BRAF antibody人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒
NA隱色結晶紫標準品anti- BRCA1 antibody人復合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒
Methyl D-valinate hydrochloride標準品anti- BRCA1 antibody人單純皰疹?、蛐涂贵w(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒
人角膜上皮細胞Human TXLNa (Taxilin Alpha ) ELISA Kit Cappuccino蛋白抗體anti- RAB40B antibody載脂蛋白M(APOM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human TXLNb (Taxilin Beta) ELISA Kit 前列腺素過物合成酶3抗體anti- RAB41 antibody胰島素樣生長因子結合蛋白7(IGFBP7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human TLN (Talin) ELISA Kit補體因子H相關蛋白1抗體anti- RAB43 antibodyα白蛋白(AFM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human Sec23b (protein transport protein Sec23B) ELISA Kit 羧肽酶CPN2抗體anti- RAB4A antibody免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human MUSKab (Muscle Skeletal Receptor Tyrosine Kinase antibody) ELISA Kit鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2D(CaMKIIδ)anti- RAB5A antibody脂肪酸合酶(FASN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human COX-2R (Cyclooxygenase-2 Receptor) ELISA Kit電壓依賴性鈣通道Cav1.1抗體anti- RAB5A-Specific antibody脂肪酸合酶(FASN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human RNF4 (Ring Finger Protein 4) ELISA Kit CD20抗體anti- RAB5B antibody乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human LHRH/GnRH (Luteinizing Hormone Releasing Hormone) ELISA Kit 12號染色體開放閱讀框40抗體anti- RAB6A antibody野鼠色基因相關蛋白(AGRP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
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