收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng)；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

PHENYLMAGNESIUM BROMIDE鐵標(biāo)準(zhǔn)品（標(biāo)樣）anti- CAMKK2 antibody人血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒

Phenyl vinyl sulfone銅標(biāo)準(zhǔn)品（標(biāo)樣）anti- CAMKV antibody人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒

Phenylmethylsulfonyl fluoride銀（標(biāo)樣）anti- CAMLG antibody人熱休克因子1(HSF-1)ELISA試劑盒

Benzonitrile水中高錳酸鹽指數(shù)(COD錳法)（標(biāo)樣）anti- CAMP antibody人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒

NA水中高錳酸鹽指數(shù)(COD錳法)（標(biāo)樣）anti- CAMSAP1L1 antibody人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試劑盒

NA鎘（標(biāo)樣）anti- Cannabinoid receptor 1 antibody人缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒

Butyl benzoate鎘（標(biāo)樣）anti- CANT1 antibody人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒

Ethyl N-benzoyl-L-tyrosinate銅標(biāo)準(zhǔn)品（標(biāo)樣）anti- CAP1 antibody人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒

小鼠心肌細(xì)胞（乳鼠）Human IgG4 (Immunoglobulin G4) ELISA Kit高分子量角蛋白抗體anti- RND3 antibody支鏈α-酮酸脫酶(BCKDK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human MCP/CD46 (Membrane Cofactor Protein) ELISA Kit22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框39抗體anti- RND3 antibody白介素19(IL19)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human TSP-4 (Thrombospondin-4) ELISA Kit巨噬細(xì)胞炎性蛋白MIP-3a抗體anti- RNF10 antibody花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human Ponticulin ELISA KitCD13氨肽酶N抗體anti- RNF112 antibody血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human TCC C5b-9 (Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit周期素依賴性激酶9抗體anti- RNF125 antibody細(xì)胞色素P450還原酶(CPR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human TDT (Terminal Deoxynucleotidyl Transferase) ELISA Kit細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體anti- RNF133 antibodyC-型凝集素域家族3成員B(CLEC3B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human SMN1 (Survival of Motor Neuron 1, Telomeric) ELISA Kit 細(xì)胞周期調(diào)控因子34anti- RNF135 antibody神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human EM2 (Endomorphin 2) ELISA Kit細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體anti- RNF150 antibody免疫球蛋白G(IgG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

公司產(chǎn)品采用干冰運(yùn)輸，經(jīng)過(guò)逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時(shí)停止其生命活動(dòng)，保存其活性，使您的實(shí)驗(yàn)更生動(dòng),公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

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