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小鼠乳腺上皮細(xì)胞

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-10-20 12:23:01瀏覽次數(shù):183次

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公司產(chǎn)品采用干冰運(yùn)輸,經(jīng)過逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時(shí)停止其生命活動(dòng),保存其活性,使您的實(shí)驗(yàn)更生動(dòng),公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

 產(chǎn)品名稱

 規(guī)格

 貨號(hào)

 小鼠乳腺上皮細(xì)胞

 5×105

XG-X6499

       產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng);3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

AMMONIUM SUCCINATE水中錳標(biāo)準(zhǔn)溶液(5%硝酸,0.25%鹽酸)anti- CCT2 antibody人血小板性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒

Dibutyl succinate水中錳標(biāo)準(zhǔn)溶液(5%硝酸,0.25%鹽酸)anti- CCT3 antibody人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒

Dimethyl succinate水中錳標(biāo)準(zhǔn)溶液(5%硝酸,0.25%鹽酸)anti- CCT3 antibody人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA試劑盒

Diethyl succinate水中鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(10%硝酸,1%鹽酸)anti- CCT4 antibody人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒

Succinicanhydride ;Succinic acid anhydride;Succinyl oxide;2,5-Diketotetrahydrofuran;Dihydro-2,5-furandione;Bernsteinsaure anhydride水中鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(5%硝酸)anti- CCT5 antibody人B細(xì)胞受體(BCR)ELISA試劑盒

Disodium succinate hexahydrate水中鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(5%硝酸,0.4%鹽酸)anti- CCT6A-Specific antibody人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA試劑盒

Succinimide水中鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(5%硝酸,0.4%鹽酸)anti- CCT6B antibody人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISA試劑盒

n-Butyllithium水中鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(5%硝酸,0.4%鹽酸)anti- CCT7 antibody人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒

小鼠乳腺上皮細(xì)胞Human EAR12 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 12) ELISA Kit細(xì)胞維酸結(jié)合蛋白2抗體anti- RRP1 antibodyS100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human EAR3 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 3) ELISA Kit2號(hào)染色體開放閱讀框80抗體anti- RRP36 antibody蛋白Z依賴性蛋白酶抑制因子(ZPI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human NOG (Noggin) ELISA Kit酸化CD32B抗體anti- RRP7A antibody賴氨酰酶(LOX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human NE/ELA2 (Elastase 2, Neutrophil) ELISA Kit 過敏素C3(補(bǔ)體C3)抗體anti- RRP8 antibody胞裂蛋白6(SEPT6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human PLN (Phospholamban) ELISA Kit癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子抗體anti- RRP9 antibody蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅱα(MAT2α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human RIPK2 (Receptor TNFRSF Interacting Serine Threonine Kinase 2) ELISA Kit細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1抗體anti- RRS1 antibodyGPI錨定分子樣蛋白(GML)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human TNK2 (Tyrosine Kinase, Non Receptor 2) ELISA Kit半蛋白酶抑制劑7抗體anti- RSAD2 antibodyB-細(xì)胞κ-輕肽基因增強(qiáng)子抑制因子激酶β(IκBKβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human DAF (Decay Accelerating Factor) ELISA Kit 22號(hào)染色體開放閱讀框29抗體anti- RSK2 antibody核糖體蛋白L23A(RPL23A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

收到細(xì)胞如何處理?

1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。

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