收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進行傳代操作。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細(xì)胞懸浮生長。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

EC 3.1.3.1大米粉成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- CNOT7 antibody小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒

NA大米粉成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- CNOT8 antibody小鼠髓過物酶(MPO)ELISA試劑盒

PHENYLMERCURIC NITRATE水質(zhì)監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)-揮發(fā)酚（標(biāo)樣）anti- CNPase antibody小鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒

Janus Green B水質(zhì)監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)-醛（標(biāo)樣）anti- CNPY2/MSAP antibody小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒

Potassium pyrophosphate水質(zhì)監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)-硝酸鹽（標(biāo)樣）anti- CNPY2/MSAP antibody小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒

Sodium pyrophosphate decahydrate水質(zhì)監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)-硝酸鹽氮（標(biāo)樣）anti- CNPY3 antibody小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒

Squalane水質(zhì)監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)-亞硝酸鹽（標(biāo)樣）anti- CNPY4 antibody小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑盒

NA水質(zhì)監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)-亞硝酸鹽氮（標(biāo)樣）anti- CNR2 antibody小鼠末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒

大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞Human VIL1 (Villin 1) ELISA Kit死亡相關(guān)蛋白1抗體anti- SLC25A3 antibody微小染色體維持缺陷蛋白5(MCM5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human  PI3/Elafin (Peptidase Inhibitor 3, Skin Derived) ELISA Kit細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白1抗體anti- SLC25A33 antibody肝配蛋白A4(EFNA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human TTPα (Alpha Tocopherol Transfer Protein) ELISA KitDEK癌基因結(jié)合蛋白anti- SLC25A34 antibodyEB病誘導(dǎo)蛋白3(EBI3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human FNDC5 (Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5) ELISA Kit腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體anti- SLC25A4 antibody前妊娠蛋白關(guān)聯(lián)內(nèi)膜蛋白(PAEP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human IL-21 (Interleukin 21) ELISA KitCaspase 激活的脫氧核糖核酸酶抗體anti- SLC25A45 antibody淋巴細(xì)胞抗原75(LY75)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human SSADH (Succinate-semialdehyde dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體anti- SLC25A46 antibodyCD276分子(CD276)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human POSTN/OSF-2 (Periostin) ELISA Kit  凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體anti- SLC25A5 antibody信號素3E(SEMA3E)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human MMP-15 (Matrix Metalloproteinase 15) ELISA Kit 凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體anti- SLC25A6 antibody小白蛋白(PVALB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

公司產(chǎn)品采用干冰運輸，經(jīng)過逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時停止其生命活動，保存其活性，使您的實驗更生動,公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

公司產(chǎn)品采用干冰運輸，經(jīng)過逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時停止其生命活動，保存其活性，使您的實驗更生動,公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.