收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

細胞培養(yǎng)步驟：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細胞懸浮生長。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

Methyl glycolate酮中茚蟲威標準品anti- CEBPA antibody小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒

Mannitol Ferment Medium腈中茚蟲威標準品anti- CEBPB antibody小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒

NA酮中順式戊菊酯標準品-S-戊菊酯anti- CEBPG antibody小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒

NA苯中順式戊菊酯標準品-S-戊菊酯anti- CEBPZ antibody小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒

NA二氯烷中1,4-苯醌標準品anti- CEND1 antibody小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒

TRIOLEIN醇中1,4-苯醌標準品anti- CENPC antibody小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒

Heparin sodiuM salt;Hepsal;Lipohepin;LiqueMin;Lipohepinette;Longheparin;Monoparin;Panheprin;PularinHPLC水中1,4-苯醌標準品anti- CENPF antibody小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒

NA三氯烷中四聚醛溶液標準物質-聚醛anti- CENPH antibody小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒

小鼠內臟脂肪細胞Human SERT (Serotonin Transporter ) ELISA Kit 酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體anti- SELS antibody5-羥色胺受體2C(HTR2C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human BMG/β2-MG (Beta-2-Microglobulin) ELISA KitDNA聚合酶δ2/DNA pol δ 2抗體anti- SEMA3C antibody腎上腺髓質素受體(AMR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human TPP (Thrombus Precursor Protein) ELISA KitDNA聚合酶δ催化亞單位/DNA pol δ cat抗體anti- SEMA3D antibody翻譯調節(jié)腫瘤蛋白1(TPT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human TXB2 (Thromboxane B2) ELISA KitDNA聚合酶η抗體anti- SEMA4F antibody解整合素金屬蛋白酶15(ADAM15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human STC2 (Stanniocalcin 2) ELISA KitDNA聚合酶γ/DNA pol γ抗體anti- Semenogelin-1 antibody酸肌醇-3-激酶催化亞基δ肽(PIK3Cδ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human FG (Fibrinogen) ELISA KitDNA聚合酶ι/DNA pol ι抗體anti- SENP1 antibody載脂蛋白C3(APOC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human FDP (Fibrinogen Degradation Product) ELISA KitDNA聚合酶κ/DNA pol κ抗體anti- SENP3 antibody胃動蛋白1(GKN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human FPA (Fibrinopeptide A) ELISA KitDNA聚合酶λ/DNA pol λ抗體anti- SENP5-Specific antibody白介素22受體α2(IL2Rα2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

公司產品采用干冰運輸，經(jīng)過逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時停止其生命活動，保存其活性，使您的實驗更生動,公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

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