大鼠氣管和支氣管組織提取物 【Rat Airway: Normal Bronchial and Tracheal Derivatives】
氣管和支氣管是連接喉與肺之間的管道，均以“C”型的透明軟骨為支架，以保持其開放狀態(tài)，相鄰軟骨之間借韌帶連接。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠氣管和支氣管組織中高質量的總RNA，PCR準備的條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備大鼠氣管和支氣管 組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。

操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
注意事項：
1. 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

GliMepiride Related CoMpound C;GliMepiride urethaneBcr抗體anti- NIPSNAP3A antibody內皮抑素(ES)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Glyceryl Behenate酸化乳腺癌易感基因1抗體(人)anti- NIPSNAP3B antibody免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Glyceryl Monolinoleate酸化T淋巴細胞受體抗體anti- NISCH antibody免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Granisetron Related CoMpound A;2-Methyl-N-[(1R,3r,5S)-9-Methyl-9-azabicyclo[3.3.1]non-3-yl]-2H-indazole-3-carboxaMideB淋巴細胞連接蛋白抗體anti- NIT1 antibody免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Granisetron Related CoMpound B;N-[(1R,3r,5S)-9-Methyl-9-azabicyclo[3.3.1]non-3-yl]-1H-indazole-3-carboxaMide酸化T淋巴細胞連接蛋白抗體anti- NIT2 antibody免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Granisetron Related CoMpound C;N-[(1R,3r,5S)-9-azabicyclo[3.3.1]non-3-yl]-1-Methyl-1H-indazole-3-carboxaMide hydrochloride蛋白激酶ATK抗體anti- NKD2 antibody免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Granisetron Related CoMpound D;1-Methyl-1H-indazole-3-carboxylic acid酸化細胞死亡調解子抗體anti- NKG2A antibody免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Griseofulvin;AMudane;Curling factor;Fulcin;Fulvicin;Grifulvin;GrisactBcl-10抗體anti- NKIAMRE antibody免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

大鼠氣管和支氣管組織提取物 ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide), for live-cell imaging 內質網綠色熒光探針（活細胞）炎癥因子3抗體（穿透素）Human PRAP1(Proline-rich acidic protein 1) ELISA Kit雄激素受體試劑盒

ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging 內質網藍色熒光探針（活細胞）酸化α型-過酶活化增生受體抗體Human SDCCAG3(Serologically defined colon cancer antigen 3) ELISA Kit胸腺依賴性抗原試劑盒

Fixogum Rubber Cement Fixogum橡膠膠水 小鼠增殖細胞核抗原單克隆抗體Human LTBP2(Latent-transforming growth factor beta-binding protein 2) ELISA Kit試劑盒

4×Tris-HCl濃縮膠緩沖液,pH6.8酸化視網膜母細胞瘤樣蛋白p107抗體Human SLC40A1(Solute carrier family 40 member 1) ELISA Kitβ4試劑盒

pUM19-T Vector TA克隆載體視網膜母細胞瘤相關蛋白p130抗體Human SLC2A3(Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 3) ELISA Kitα1試劑盒

Fast Wrights-Giemsa Stain快速瑞氏-姬姆薩染液（50ml×1, 50ml×2）蛋白酸酶2Cα抗體Human NEBL(Nebulette) ELISA Kit胸腺嘧啶核苷酸化酶試劑盒

β-Glycerophosphate disodium salt hydrate 甘油酸鈉水合物B淋巴細胞誘導成熟蛋白1抗體Human ETFβ(Electron transfer flavoprotein subunit beta) ELISA Kit胸腺基質淋巴細胞生成素試劑盒

NADP•Na2型輔酶II二鈉成對螺旋細絲蛋白抗體Human CLCF1(Cardiotrophin-like cytokine factor 1) ELISA Kit胸腺活化調節(jié)趨化因子試劑盒

培養(yǎng)步驟：

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。