小鼠肺大靜脈組織提取物【Mouse Lung: Normal Vein Derivatives】
肺大靜脈管壁分為內(nèi)膜、中膜和外膜。無內(nèi)彈性膜或不明顯；中膜不發(fā)達(dá)；外膜則較厚。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠肺大靜脈組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠肺大靜脈組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細(xì)胞懸浮生長。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
公司產(chǎn)品采用干冰運(yùn)輸，經(jīng)過逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時停止其生命活動，保存其活性，使您的實(shí)驗(yàn)更生動,公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

Ethyl isobutyrate陰離子交換蛋白2抗體anti- MSI2 antibody氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

ISOXABEN鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體anti- MSK1 antibody氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

isophorone diisocyanate錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體anti- MSL1 antibody氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

ISOQUERCITRIN細(xì)胞凋亡增強(qiáng)核酸酶抗體anti- MSL3 antibodyD-二聚體(D2D)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

DL-Isoborneol染色體脆弱性相關(guān)基因抗體anti- MN antibody蛋白激酶D1(PRKD1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

ISOMALTOTRIOSE銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體anti- MN antibody鐵蛋白(FE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Isoimperatorin含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體anti- MSRA antibody淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原2(LFA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

3-Isocyanatopropyltriethoxysilane含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體anti- MSRB2 antibody組織因子(TF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

小鼠肺大靜脈組織提取物Cochliobolus heterostrophus Drechsler, tele ..NOGO相互作用線粒體蛋白1抗體Human MMP15(Matrix metalloproteinase-15) ELISA Kit核連蛋白2(NUCB2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

freeze-dried間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體Human RPIA(Ribose-5-phosphate isomerase) ELISA Kit嘌呤霉素敏感性氨肽酶(PSA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Homo sapiens, human酸化間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體Human PRF1(Perforin-1) ELISA KitWAP四二硫化物核心域蛋白5(WFDC5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Phialocephala virens Siegfried et Seifert核仁蛋白C23抗體Human MS4A1(B-lymphocyte antigen CD20) ELISA Kit真核翻譯起始因子2α激酶3(EIF2αK3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

dried神經(jīng)細(xì)胞穿透素2抗體Human ADAM17(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 17) ELISA Kit肉棕櫚?；D(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..A型流感核蛋白抗體Human LTK(Leukocyte tyrosine kinase receptor) ELISA Kit氧固醇結(jié)合蛋白樣蛋白8(OSBPL8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Mycobacterium tuberculosis (Zopf) Lehmann a ..神經(jīng)細(xì)胞粘附分子2抗體Human PSG11(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 11) ELISA Kit核苷酸還原酶M1(RRM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Bos taurus, cow軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體Human MSMP(Prostate-associated microseminoprotein) ELISA Kit銜接因子相關(guān)蛋白復(fù)合體2μ1(AP2μ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)