人腦MatchPair: 小腦和腫瘤組織提取物【Cerebellum MatchPair: Normal Human Cerebellum Derivatives and Cerebellum Tumor Derivatives】
小腦位于大腦半球后方，覆蓋在腦橋及延髓之上，橫跨在中腦和延髓之間，小腦通過與大腦、腦干和脊髓之間豐富的傳入和傳出系，參與軀體平衡和肌肉張力（肌緊張）的調節(jié)，以及隨意運動的協(xié)調。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體小腦組織和腫瘤組織中高質量的總RNA，PCR準備的條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小腦和腫瘤組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克??；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。

培養(yǎng)步驟：

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：
1. 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

Human CD3d (Cluster of Differentiation 3d) ELISA Kit 癌胚抗原抗體anti- PACSIN2 antibody脂酰肌醇特異性酯酶Cβ1(PLCβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human AGR2 (Anterior Gradient Protein 2) ELISA Kit細胞粘附分子相關蛋白/癌基因下調蛋白抗體anti- PACSIN3 antibody二?；视?DAG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human AGRN (Agrin) ELISA Kit肥大細胞羧肽酶A3抗體anti- PADI2 antibody白介素18(IL18)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human AGT (Angiotensinogen) ELISA KitⅡ型膠原蛋白抗體anti- PADI4 antibody肥胖抑制素(OB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human AIF1 (Allograft Inflammatory Factor 1) ELISA Kit軟骨蛋白1抗體anti- PAF1 antibody葡萄糖轉運蛋白2(GLUT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human AIG1 (Androgen Induced Protein 1) ELISA Kit 顱面部發(fā)育蛋白1抗體anti- PAFAH antibody葡萄糖轉運蛋白2(GLUT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human ALCAM (Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit酸化酪蛋白激酶1γ1+γ2+γ3抗體anti- PAFAH1B2 antibody過物酶體增殖物激活受體δ(PPARδ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human ALDH (Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial) ELISA Kit原卟啉酶3抗體anti- PAFAH1B3 antibody法尼酯X受體(FXR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

人腦MatchPair: 小腦和腫瘤組織提取物GRE luciferase reporter plasmid 熒光素酶報告基因（報告基因質粒） 蛋白O巖藻糖基轉移酶1抗體Human DRAM1(DNA damage-regulated autophagy modulator protein 1) ELISA Kit妊娠特異性蛋白B試劑盒

GLI luciferase reporter plasmid 熒光素酶報告基因（報告基因質粒） 鈣/鈣調素依賴蛋白激酶1β/CaMKIβ抗體Human MBOAT4(Ghrelin O-acyltransferase) ELISA Kit妊娠特異性β1糖蛋白4試劑盒

GATA luciferase reporter plasmid 熒光素酶報告基因（報告基因質粒） PSD95相關緊密連接蛋白PATJ抗體Human LRP5(Low-density lipoprotein receptor-related protein 5) ELISA Kit妊娠特異性β1糖蛋白試劑盒

GAS luciferase reporter plasmid 熒光素酶報告基因（報告基因質粒） 血小板源性生長因子AA+BB抗體Human ATP13A2(Probable cation-transporting ATPase 13A2) ELISA Kit妊娠皰疹抗體試劑盒

Estrogen Receptor (ER) luciferase reporter plasmid 熒光素酶報告基因（報告基因質粒） PDZ結構域PDZK9蛋白抗體Human DNAJC27(DnaJ homolog subfamily C member 27) ELISA Kit熱休克蛋白糖蛋白96試劑盒

Luciferase Reporter Gene Assay Kit熒光素酶報告基因檢測試劑盒脂滴包被蛋白A+B抗體Human MSMB(Beta-microseminoprotein) ELISA Kit熱休克蛋白90kDaβ試劑盒

Coelenterazine腔腸熒光素原鈣粘蛋白β5抗體Human RSAD2(Radical S-adenosyl methionine domain-containing protein 2) ELISA Kit熱休克蛋白75 kDa,線粒體試劑盒

D-Luciferin Firefly,free acid/D-螢火蟲熒光素小鼠抗萊克多巴胺單克隆抗體Human TMEM132D(Transmembrane protein 132D) ELISA Kit熱休克蛋白72試劑盒