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上海西格生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測(cè)試劑盒>> 50T埃希氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒

埃希氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-02 14:09:16瀏覽次數(shù):126次

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耐久腸球菌(堅(jiān)韌鏈球菌)

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點(diǎn):
1.  即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

 埃希氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒

英文名稱

 Escherichia spp.PCR

貨號(hào)

 XG-P1419

 


注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:

編號(hào)

成分

十孔盒包裝(去紙托)

試劑一

2×PCR MagicMix

1mL(亮黃蓋)

試劑二

源性成分 PCR 引物混合液

100 uL(白蓋)

試劑三

源性成分 PCR 陽(yáng)性對(duì)照

50 uL(黃蓋)

試劑四

超純水

1 mL(本色蓋)

試劑五

DNA   釋放劑試用裝

50 次(成分見(jiàn)下)

試劑六

免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一

50 uL(白蓋)

試劑七

免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二

100uL(綠蓋)

試劑八

免 DNA 提取試劑溶液 B

400 uL(紅蓋)

試劑九

使用手冊(cè)

400 uL(紅蓋)

技術(shù)原理:

       DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。

戊烷脒50mg加入戊烷脒多粘菌素瓊脂

Dnase test agar DNA酶測(cè)試瓊脂 1.10449.0501 MERCK默克 incubation media Dnase test agar DNA酶測(cè)試瓊脂 1.10449.0501 MERCK默克

0.5%無(wú)菌TTC溶液 2ml/支x10 每支添加于200ml(027020)中配成TTC-吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂。

骨髓間質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化*培養(yǎng)基Adultbonemarrowmesenchymalstemcellsintochondrocytesinduceddifferentiationofcompletemedium

LPM添加劑 1ml*5 每支添加于200mlHB4189中Sebacic acid  癸二酸  111-20-6

  火棉膠

n-Hendecane  十一烷  1120-21-4

DIPHENYLAMINE-4-SULFONIC ACID BARIUM SALT  二苯胺磺酸鋇  6211-24-1IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S2

CL-0093HCC1937(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HL細(xì)胞,系 人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞,U937細(xì)胞 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32

BEL-7402(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CTSD Others Mouse 小鼠 Cathepsin D / CTSD 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
埃希氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒NTM培養(yǎng)基250g用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)

50094 BR 10Kg incubation media 50094 BR 10Kg

茯苓 食用 支/瓶

Amies運(yùn)送培養(yǎng)基管20支/包用于致病菌標(biāo)本的運(yùn)送保存

YM培養(yǎng)基 250g 用于霉菌和酵母菌的增菌培養(yǎng)  進(jìn)口分裝  人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165(VEGF165)ELISA試劑盒

5-氮胞苷/阿扎胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷  進(jìn)口分裝  人心納素(ANF)ELISA試劑盒

,對(duì)氨基苯甲酸乙酯  進(jìn)口分裝  人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒

鹽酸  進(jìn)口分裝  人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒SIRPA Others Mouse 小鼠 SIRP alpha / CD172a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-R012大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)小鼠淋巴瘤細(xì)胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C) in mouse lymphoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

IL17A Protein Marmoset 重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白

人腦膜細(xì)胞 (HMC)( 5×105 ) 細(xì)胞名稱 NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞

產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

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