產(chǎn)品名稱：腸道病毒通用PCR檢測試劑盒
英文名稱：Enterovirus(EV)RTPCR
編號：XG-P1392
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分：

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

血平板2407090mm×20個用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB4789./T4789.37-2008，GB4789.30-2...

Schaedler Anaerobic Broth /Schaedler 厭氧肉湯 Oxoid 500G incubation media Schaedler Anaerobic Broth /Schaedler 厭氧肉湯 Oxoid 500G

斯氏梭菌 支/瓶

乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂250g用于濾膜MUG法檢測食品中大腸菌群數(shù)(SN/T2)

Salmonella-ShigellaAgar銅粉Copper powder5N50g

硼酸Boric acid4N25g

流銨Ammonium sulfate4N10g

二甲亞砜Dimetxyl sulfoxide色固25ml

鋅粒Zinc tablets5N25g人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HCMEC)( 5×105 )

黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞;NRm

CL-0027AsPC-1(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠紅白血病細(xì)胞;MEL 小鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞 Rattus

SDC1 Others Mouse 小鼠 SDC1 / Syndecan-1 / SYND1 / CD138 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
腸道病毒通用PCR檢測試劑盒PALCAM瓊脂基礎(chǔ)26070250g用于單增李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB4789.30-20/T0005)。

三糖鐵瓊脂 (CM0277) Oxoid incubation media 三糖鐵瓊脂 (CM0277) Oxoid

珊瑚鏈霉菌 支/瓶

contactsmedium

瓊脂培養(yǎng)基F 250g 用于腸道菌計數(shù)和腸桿菌科鑒別大鼠二胺氧化酶  進口分裝  Angoroside C  Angoroside C  115909-22-3  C36H48O19  ≥98%

大鼠γ谷酰轉(zhuǎn)移酶1  進口分裝  Elemicin  Elemicin  487-11-6  C12H16O3  ≥98%

大鼠缺氧誘導(dǎo)因子-1α  進口分裝  Isoferulic acid  Isoferulic acid  25522-33-2  C10H10O4  ≥98%

大鼠白細(xì)胞間介素31  進口分裝  Nitidanin  Nitidanin  171674-89-8  C21H24O8  ≥98%HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物HRPTEpiCL

小鼠淋巴瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞);YAC-1

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL

HuH-7人肝癌細(xì)胞 Human

CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 

技術(shù)原理：

       DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。