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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T大片吸蟲通用PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-11-02 14:20:13瀏覽次數(shù):112次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個(gè)過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時(shí)樣品的制備。
1. 快速,整個(gè)過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運(yùn)輸及保存2. 一管式,在一個(gè)試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動(dòng)化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。
本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Fasciola spp.PCR |
貨號(hào) | XG-P1429 |
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液的體積。將PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至一個(gè)新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆颉?/span>
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時(shí)DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質(zhì),以獲得高質(zhì)量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時(shí)也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預(yù)熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會(huì)提高提取DNA目的段的產(chǎn)量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號(hào)管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20 μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后*后加)
衛(wèi)矛醇半固體瓊脂培養(yǎng)基,用于細(xì)菌衛(wèi)予醇發(fā)酵試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
EthylVioletAziodeBroth
葡萄球菌增菌肉湯 Staphylococcus Enrichment Broth 250 用于凝固酶陽性葡萄球菌的選擇性增菌
Nitsch&Nitsch培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)incubationmediaNitsch&Nitsch培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)
含225ml7.5%氯肉湯均質(zhì)袋 10個(gè)/包 用于金葡菌前增菌培養(yǎng)TERT-BUTYL N-(2-HYDROXYETHYL)CARBAMATE N-(叔丁氧羰基)乙醇胺 26690-80-2
Rifampicin 13292-46-1
BOC-CYS(4-MEBZL)-OL BOC-CYSTEINOL(PMEBZL) 129397-85-9
BOC-CYS(BZL)-OL N-叔丁氧羰基-S-芐基-L-半胱醇 139428-96-9TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
細(xì)胞
G422瘤 神經(jīng)膠質(zhì)瘤
LS 174T人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 LS 174T human colon adenocarcinoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人卵巢上皮細(xì)胞(HOSEpiC) ( 5×105 ) Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 Human
大片吸蟲通用PCR檢測試劑盒Nitrate(KCN)BrothBase
改良GAM肉湯 250g 用于脆弱抑桿菌的增菌培養(yǎng)
葡萄糖瓊脂 Dextrose Agar 250 用于細(xì)菌的綜合生化試驗(yàn)
incubationmedia
ShigellaEnrichmentBroth糠酸莫米松 進(jìn)口分裝 牛α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒
進(jìn)口分裝 裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
異肼 進(jìn)口分裝 雞免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
硫酸/硫酸DL-莨菪堿 進(jìn)口分裝 雞雌二醇(E2)ELISA試劑盒GRK5 Others Human 人 GRK5 / GPRK5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
角膜內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292
NK-92MI細(xì)胞,人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞,HepG2.2.15細(xì)胞 CL-0192RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21
KIRREL Others Mouse 小鼠 KIRREL1 / NEPH1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
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