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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-04 13:15:01瀏覽次數(shù):183次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Mannheimia granulomatisPCR |
貨號 | XG-P1709 |
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基250g用于霉菌的鑒定培養(yǎng)
GN增菌液 1000(g) incubation media GN增菌液 1000(g)
無鹽胰胨水發(fā)酵管 無鹽胰胨水發(fā)酵管 20支 BR
UVM培養(yǎng)基250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaUVM培養(yǎng)基250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn))
布氏瓊脂 250g 用于彎曲桿菌的抗生素敏感性試驗和純化培養(yǎng)。1-PYREUTYRIC ACID 1-芘丁酸 3443-45-6
Palladium monoxide 氧化 1314-08-5
4-Bromobutyric acid 4-溴丁酸 2623-87-2
Palladium sulfate 13566-03-5ICAM1 Others Rat 大鼠 ICAM1 / CD54 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
雪旺氏細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
MS1 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A
C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞
人癌細(xì)胞;MCF 7B 大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒GN增菌液(20主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
C.L.E.D培養(yǎng)基 250g 用于尿液中微生物的選擇性分離培養(yǎng)
WL營養(yǎng)瓊脂 WL Nutrient Agar 250 用于啤酒和發(fā)酵產(chǎn)品中酵母菌和細(xì)菌的計數(shù)
醋酸鉛培養(yǎng)基250g/瓶用于細(xì)菌產(chǎn)硫化氫試驗,每培養(yǎng)基中添加0ncubationmedia醋酸鉛培養(yǎng)基250g/瓶用于細(xì)菌產(chǎn)硫化氫試驗,每培養(yǎng)基中添加0104
GVPC瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于軍團(tuán)菌的選擇性分離培養(yǎng)(進(jìn)口) 進(jìn)口分裝 小鼠組胺(mouse HIS)
酒石酸溴莫尼定(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口分裝 小鼠干擾素-r(mouse IFN-r)
尼泊金丙酯;對羥基苯甲酸丙酯 進(jìn)口分裝 小鼠抑制素A(mouse Inhibin A)
土拉霉素A,托拉菌素A,泰拉霉素 進(jìn)口分裝 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)素3(mouse NT-3)TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
冠狀動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4
FO細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞 人胚肝二倍體細(xì)胞,CCC-HEL-1細(xì)胞 CL-0208SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-
LAMP3 Others Human 人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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