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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T奧利華斯病毒PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-05 12:39:57瀏覽次數(shù):189次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線產(chǎn)品名稱:奧利華斯病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Oliveros virus(OLVV)RTPCR
編號:XG-P1850
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD)250g用于測定酵母菌總數(shù)
氯血瓊脂基礎(chǔ) 250(g) incubation media 氯血瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
乙酰胺酚紅瓊脂 Acetamide Agar 250克 測定綠膿桿菌色素分離、培養(yǎng)
細(xì)菌L型分離瓊脂于L型細(xì)菌分離培養(yǎng)incubationmedia細(xì)菌L型分離瓊脂于L型細(xì)菌分離培養(yǎng)
臘樣芽孢桿菌選擇瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于臘樣芽孢桿菌選擇性分離培養(yǎng)Glycyrrhizic acid 甘草酸 1405-86-3
Enoxolone 甘草次酸 471-53-4
LIQUIRITIN(SH) 甘草苷 551-15-5
ISOLIQUIRITIN 異甘草甙 5041-81-6CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞
表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293ET
KC細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞 小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞,Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細(xì)胞 CL-0373KiMA(人胚腎上皮細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2
BGC-803(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HWP-c subcutaneous 人類白前脂肪細(xì)胞(HWP)皮下 500,000cells 人淋巴成纖維細(xì)胞HLF
奧利華斯病毒PCR檢測試劑盒CHO培養(yǎng)基基礎(chǔ)250g用于厭氧菌的糖生化反應(yīng)
哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ) Columbia Blood Agar Base 營養(yǎng)非常豐富,用于各種細(xì)菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
肉湯 Arginine Broth acc. To Schubert 250 用于游泳池中假單胞菌檢測(Merck方法)
桔汁肉湯(縮)250g/瓶用于耐酸細(xì)菌的培養(yǎng)incubationmedia桔汁肉湯(縮)250g/瓶用于耐酸細(xì)菌的培養(yǎng)
PlateCountAgarMUG營養(yǎng)瓊脂 進(jìn)口分裝 N-芐基甘酸鹽酸鹽 Bzl-Gly-OH•HCl : 7689-50-1 質(zhì)量規(guī)格: 0.98
動力-鹽培養(yǎng)基(A法) 進(jìn)口分裝 D-丙酰胺鹽酸鹽 D-Alaninamide hydrochloride : 71810-97-4 質(zhì)量規(guī)格: >98%,BR
吐溫80營養(yǎng)瓊脂 進(jìn)口分裝 D-蘇酸 H-D-Thr-OH : 632-20-2 質(zhì)量規(guī)格: >98%,BR
7.5%化鈉肉湯 進(jìn)口分裝 噻奈普汀酸;噻奈普汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Tianeptine : 66981-73-5 質(zhì)量規(guī)格: HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品ADM Others Human 人 ADM / Adrenomedullin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞 Renal cell COS-1 in African green monkey SV40 ansformation DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
IFNA13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 多形擬桿菌
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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