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當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T海水派琴蟲PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-05 13:15:04瀏覽次數(shù):151次
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一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線
產(chǎn)品名稱:海水派琴蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱:Perkinsus marinusPCR
編號:XG-P1913
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
技術(shù)原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。
硅酸鹽細菌培養(yǎng)基(不含瓊脂)250g用于硅酸鹽細菌的增菌培養(yǎng)
D/E中和肉湯 檢測消毒劑和防腐劑的消毒與衛(wèi)生效果 500g incubation media D/E中和肉湯 檢測消毒劑和防腐劑的消毒與衛(wèi)生效果 500g
多頭霉 模式菌株 支/瓶
品紅亞鈉瓊脂平板(9cm)用于飲用水,水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證
DG-18瓊脂 250g 用于食品中和酵母菌分離培養(yǎng)(Acumedia方法)Zinc tetrafluoroborate 硼酸鋅 13826-88-5
2-Acetylbenzo[b]thiophene 2-乙?;讲⑧绶? 22720-75-8
Trifluorothymine 5-三 54-20-6
2,3,5-Tribromothiophene 2,3,5-三溴噻吩 3141-24-0NP Others H2N2 甲型流感 H2N2 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1036
CM-H086人大隱靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
6-10B, 人鼻咽癌細胞系 骨髓瘤,P3-NS-1/1-Ag4.1細胞 MRC-5(人正常胚肺成纖維細胞)
BALB/C小鼠肝上皮細胞;BNL 1ME A.7R.1
CLEC6A Others Mouse 小鼠 CLEC4N 人細胞裂解液 (陽性對照)
海水派琴蟲PCR檢測試劑盒BrucellaSelectiveMedium
50192 胰蛋白胨(進口) BR 500g 酪蛋白水解而成的胨,培養(yǎng)基原材料 incubation media 50192 胰蛋白胨(進口) BR 500g 酪蛋白水解而成的胨,培養(yǎng)基原材料
粉狀畢赤酵母 分解纖維素 支/瓶
NutrientAgar
DTMAgar大鼠軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISAKit 進口分裝 反式(2,3)-二丁苯那嗪 trans (2,3)-Dihydro Tetraben : 3466-75-9 質(zhì)量規(guī)格: 美國進口
大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISAKit 進口分裝 芐星G Penicillin G benzathine salt : 1538-09-6 質(zhì)量規(guī)格: 美國進口
大鼠雄激素(androgen)ElISAKit 進口分裝 遠志皂苷元 A0014 2469-34-3 HPLC≥99% 20mg/支
大鼠上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISAKit 進口分裝 內(nèi)酯 A0036 5508-58-7 HPLC≥98% 20mg/支HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
骨骼肌細胞培養(yǎng)基SkMCM-prf
人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17
大鼠骨骼肌成肌細胞;L6 惡性黑色素瘤細胞,A-375[A375]細胞 RF/6A細胞,綠猴猴脈絡膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞
RL95-2, 人內(nèi)膜腺癌細胞系 Human
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細胞裂解液 (陽性對照)
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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