當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T鵝螺旋體病PCR檢測試劑盒
參 考 價 | 面議 |
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產品名稱 | |
英文名稱 | Spirocheta anserinaPCR |
貨號 | XG-P2105 |
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
布氏肉湯添加劑2ml*5每支加入225ml布氏肉湯中
NA培養(yǎng)基 NA Medium 用于菌落總數(shù)測定
抗生素檢定培養(yǎng)基4號 Antibiotic Agar No.4 250 用于等的效價測定
Pfizer腸球菌選擇性瓊脂(PSE瓊脂)250g/瓶用于糞鏈球菌選擇性分離incubationmediaPfizer腸球菌選擇性瓊脂(PSE瓊脂)250g/瓶用于糞鏈球菌選擇性分離
ListeriaEnrichmentBrothBase超氧化物歧化酶 進口分裝 16-Oxoalisol A 16-Oxoalisol A 124515-98-6 C30H48O6 ≥98%
酪酸激酶A 進口分裝 28-Hydroxy-3-oxoolean-12-en-29-oic acid 28-Hydroxy-3-oxoolean-12-en-29-oic acid 381691-22-1 C30H46O4 ≥98%
人血栓調節(jié)蛋白 進口分裝 Als acid B Als acid B 1159579-45-9 C30H46O3 ≥98%
上腺素 進口分裝 Betulin caffeate Betulin caffeate 89130-86-9 C39H56O5 ≥98%人齒根膜韌帶成纖維細胞(HPDLF)( 5×105 )
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9402
CL-0406NCI-H838(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2
人前列腺癌低轉移細胞株;PC-3M-2B4 大鼠滑膜細胞*培養(yǎng)基 100mL
CT-26 WT 小鼠結腸癌細胞
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) HA 人細胞裂解液 (陽性對照)
鵝螺旋體病PCR檢測試劑盒30%DextroseBroth
Todd-Hewitt 肉湯 250(g) incubation media Todd-Hewitt 肉湯 250(g)
BBE瓊脂 BBE Agar 250克 脆弱擬桿菌群的分離培養(yǎng)
糖發(fā)酵基礎肉湯250適用于微生物檢驗中各種糖發(fā)酵實驗,無菌加入各種糖醇類物質(SN標準)incubationmedia糖發(fā)酵基礎肉湯250適用于微生物檢驗中各種糖發(fā)酵實驗,無菌加入各種糖醇類物質(SN標準)
SulfiteAgar,modified乳酸桿菌選擇性肉湯 進口分裝 枯草桿菌色變種芽孢菌ATCC 9372
胰胨瓊脂培養(yǎng)基 進口分裝 厭氧消化鏈球菌ATCC 27337
堿性蛋白胨水 進口分裝 Azospirillum lipoferum生脂固氮螺菌
pH9.6葡萄糖肉湯 進口分裝 蘇云金芽胞桿菌鲇澤變種 Bacillus thuringienis var. aisawaiRSPO1 Others Human 人 RSPO1 / R-Spondin-1 (aa 1-146) 人細胞裂解液 (陽性對照)
黑色素細胞生長生長添加物MelGS
CSSTH1 中華鱉心肌來源細胞
T-107B(含100mL酶解緩沖液)10mL
RGC-5, 小鼠視網膜神經節(jié)細胞
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;Mao 人骨骼肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業(yè)進行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。
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