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中華根瘤菌通用PCR檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2020-11-12 09:59:32瀏覽次數(shù):121次

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中華根瘤菌通用PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品及特點:
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進(jìn)行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。

產(chǎn)品名稱:中華根瘤菌通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Sinorhizobium spp.PCR
編號:XG-P2104
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

 

使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1  確定PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液的體積。將PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆颉?/span>
2  將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3  12,000 rpm離心1min,棄濾液。
   注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
       若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
   注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
       此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質(zhì),以獲得高質(zhì)量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6  12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
   注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時也利于DN段的充分溶解。
7  將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預(yù)熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
   注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
       對溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會提高提取DNA目的段的產(chǎn)量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)

采樣吸取液C液體培養(yǎng)基添加劑支/管每套加入采樣吸取液C液體培養(yǎng)基中

Orange serum agar橙血清瓊脂 1.10673.0500 MERCK默克 incubation media Orange serum agar橙血清瓊脂 1.10673.0500 MERCK默克

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金氏B培養(yǎng)基(KBA) 250g 用于檢測假單胞菌的熒光素巨噬細(xì)胞刺激蛋白  進(jìn)口分裝  松果菊苷  Echinacoside  82854-37-3  C35H46O20  ≥98%

神經(jīng)原特異性烯醇化酶  進(jìn)口分裝  Stigmast-4-ene-3,6-dione  Stigmast-4-ene-3,6-dione  23670-94-2  C29H46O2  ≥98%

增殖細(xì)胞核抗原  進(jìn)口分裝  1-chloro-6-(5-(prop-1-ynyl)thiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  1-chloro-6-(5-(prop-1-ynyl)thiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  78876-52-5  C13H9ClOS  ≥98%

1型前膠原基端原肽  進(jìn)口分裝  3alpha-Akebonoic acid  3alpha-Akebonoic acid  104777-61-9  C29H44O3  ≥98%TFRC Others Cynomolgus 食蟹猴 ansferrin Receptor / TFRC / CD71 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1008

CM-H090人血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SGC7901/DDP細(xì)胞,人胃癌耐藥株 人骨髓瘤細(xì)胞,U266細(xì)胞 人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02]

ES-2(人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

BSG Others Human 人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
中華根瘤菌通用PCR檢測試劑盒30%葡萄糖溶液(PH6.5±0.5)250g用于嗜滲酵母檢驗時的樣品稀釋(GB標(biāo)準(zhǔn))

Pfizer 腸球菌選擇性瓊脂 250(g) incubation media Pfizer 腸球菌選擇性瓊脂 250(g)

支原體肉湯培養(yǎng)基 Mycoplasma Broth 250克 用于培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基

3mg/支*5每支添加于HB4ncubationmedia3mg/支*5每支添加于HB4155

改良亞鹽瓊脂 250g 用于嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù),平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養(yǎng)和計數(shù)(SN標(biāo)準(zhǔn))FB1(Half-Fraser)添加劑(A、B)2ml*40A、B各取一支添加于225mlFraser培養(yǎng)基或Half-Fraser培養(yǎng)基中  進(jìn)口分裝  大腸埃希氏菌(大腸桿菌)

四硫磺酸鹽煌綠增菌液(TTB肉湯)10ml/支*20支用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)。  進(jìn)口分裝  地衣形芽孢桿菌

Preston肉湯基礎(chǔ)  進(jìn)口分裝  植物乳桿菌 ATCC 8014

哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)(改良)  進(jìn)口分裝  大豆根瘤菌 ACCC 15067PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OM-prf

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A

CNE1-lmpl細(xì)胞,轉(zhuǎn)基因鼻咽癌細(xì)胞系 小鼠黑色素瘤細(xì)胞,B16F1細(xì)胞 CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-26130 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 腎上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml

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