目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化磷酸化系列>> 轉(zhuǎn)氫酶1測試盒紫外分光光度法
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更新時(shí)間：2023-12-27 17:25:53瀏覽次數(shù)：1031評(píng)價(jià)
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| 貨號(hào) | BK-01S6566 |
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注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)氫酶1測試盒紫外分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
檢測方法：紫外分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6566
產(chǎn)品分類：氧化磷酸化系列
商品介紹：
測定意義: TH位于線粒體的內(nèi)膜上，又稱為線粒體復(fù)合體六，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化，調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應(yīng)稱為TH-2，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。 測定原理： NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸（APAD+）替代NAD+，TH-2催化APAD+還原生成APADH，APADH在375nm有特征光吸收，測定375nm光吸收的增加速率，來計(jì)算TH-2活性。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
2 ug pCDH-EF-Luc2-T2A-TdTomato pCDH-EF-Luc2-T2A-TdTomato 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
孟加拉紅培養(yǎng)基 Rose Bengal Medium 250g
2.5ku L- 乳酸脫氫 ( 兔肌 ) L-Lactic Dehydrogenase From Rabbit Muscle Type II 4℃保存
50T 綠膿桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
5mL 腦膜細(xì)胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
100mL AMPSO Buffer，0.2M，pH8.5 AMPSO Buffer，0.2M，pH8.5 常溫保存
100次 溴化乙錠清除劑 EB Erasol 室溫保存
2 ug pACYC177 pACYC177 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
抗生素檢定培養(yǎng)基1號(hào)（低PH） Antibiotic Agar 250g
1瓶 Eca-109（GFP）細(xì)胞株 Eca-109（GFP） 低溫運(yùn)輸和保存
含900ml緩沖蛋白胨水（BPW）均質(zhì)袋 Buffered Peptone Water 900ml/袋*2
轉(zhuǎn)氫酶1測試盒紫外分光光度法RIN1 RAS抑制蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-PRKCA(Thr637) 磷酸化蛋白激C抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-eIF4G(ser1108) 磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體 規(guī)格: 0.1mlEURL/C21orf91 21號(hào)染色體開放閱讀框91抗體 規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Bio 標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlRFTN2 RFTN2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-A Raf(Tyr301/302) 磷酸化A-Raf抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-EGFR (Thr693) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
Metallothionein 金屬硫蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlKir6.2 ATP敏性鉀通道亞基kir6.2抗體 規(guī)格: 0.1ml
ANKRD13A 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-HMGCR(Ser872) 磷酸化三羥基三甲基輔A還原抗體 規(guī)格: 0.1ml
BCNG1/HCN1 腦環(huán)核苷酸門控通道蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlIFNA4/IFNA76/IFNA M1 干擾素α4抗體 規(guī)格: 0.2ml
ILVBL 乙酰酸合成蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlBCL7B BCL7B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAM134C FAM134C蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-ATG4C(Ser166) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體 規(guī)格: 0.1ml
Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體（） 規(guī)格: 0.1mlCTDSPL2 CTDSPL2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
C21orf2 21號(hào)染色體開放閱讀框2抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-CREB-1(Ser142) 磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Protein C inhibitor/SerpinA5 蛋白C抑制因子抗體 規(guī)格: 0.1mlC11orf57 11號(hào)染色體開放閱讀框57抗體 規(guī)格: 0.2ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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