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英文名稱:Calcein Red™ AM
產(chǎn)品參數(shù):
Ex (nm) 562 Em (nm) 576
分子量 1015.79 溶劑 DMSO
存儲條件 在零下15度以下保存, 避免光照
產(chǎn)品規(guī)格 1mg
產(chǎn)品貨號 21900
產(chǎn)品概述:
鈣黃綠素紅,AM是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于檢測活細(xì)胞的熒光探針,Calcein AM是用于標(biāo)記和檢測活細(xì)胞細(xì)胞功能的流行的熒光探針之一。
然而,Calcein AM的單色使得在多色應(yīng)用中不可能使用這種有價(jià)值的試劑。
例如,由于與GFP相同的顏色,不可能將Calcein AM與GFP-轉(zhuǎn)化細(xì)胞組合使用。
為了解決Calcein AM的這種顏色限制,我們開發(fā)了Calcein Orange ,Calcein Red 和Calcein Deep Red 。
這些新的Calcein AM類似物與Calcein AM結(jié)合使用,可以對活細(xì)胞進(jìn)行多色標(biāo)記和功能分析。
非熒光Calcein Red AM可以輕松進(jìn)入活細(xì)胞并水解產(chǎn)生強(qiáng)熒光Calcein Red 染料??梢允褂贸R姷腡RITC / Cy3濾波片組檢測Calcein Red 染料。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優(yōu)質(zhì)的鈣黃綠素紅,AM。
光譜:
2.適用儀器
流式細(xì)胞儀
Ex:532/561 nm
Em:585/40 nm
熒光顯微鏡
Ex: TRITC 濾波片組
Em: TRITC 濾波片組
推薦孔板: 黑色透明底板
熒光酶標(biāo)儀
Ex:540 nm
Em:590 nm
Cutoff:570 nm
推薦孔板:黑色透明底板
讀取模式:底讀模式
3.實(shí)驗(yàn)方案:
操作步驟
1.準(zhǔn)備HHBS緩沖液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
2.在高質(zhì)量無水DMSO中制備2 mM至5 mM Calcein Red AM原液。
2.1使用Calcein Red AM的量:1毫克
2.2所需濃度:2 mM
2.3在合適的容器中,將1mg Calcein Red TM AM與492.23μL無水DMSO混合。
3.使用10μMCalceinRed AM 4在HHBS中制備2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2 mM*磺舒。
3.1終孔內(nèi)濃度的Calcein Red AM:5μM
3.2Pluronic®F-127的終井內(nèi)濃度:0.04%
3.3終孔內(nèi)濃度的*磺舒:1mM
3.4在合適的容器中,混合16μL的Calcein Red AM,25.6μL的10%Pluronic F-127和256μL的25mM*磺舒。然后,添加HHBS或您選擇的緩沖液,直到體積為3.2 mL。
注意:對于大多數(shù)細(xì)胞系,我們建議Calcein Red AM的終度為4至5μM。
注意:推薦的Pluronic F-127孔濃度為0.02%至0.04%。
注意:推薦的濃度為1至2.5 mM的Probenecid。
4.將100μL染料工作溶液加入已經(jīng)含有100μL培養(yǎng)基的所需孔中。
4.1該步驟將染料工作溶液從2X稀釋至1X,并將每種組分的終濃度調(diào)節(jié)至以下:5μM的Calcein Red AM,0.04%Pluronic F-127,1mM*磺舒。
5.孵育染料
5.1將染料加載板在細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育20-60分鐘。
5.2將染料加載板在室溫下孵育30分鐘。
6.用1.0 mM Probenecid準(zhǔn)備HHBS緩沖液(或您選擇的緩沖液)。
6.1在合適的容器中加入160μL的25mM*磺舒。然后,添加HHBS或您選擇的緩沖液,直到體積為4 mL。
7.用HHBS緩沖液或您選擇的緩沖液替換染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,從所需孔中除去200μL染料工作溶液和培養(yǎng)基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM*磺舒的HHBS(或您選擇的緩沖液)。
8.運(yùn)行實(shí)驗(yàn)
8.1為您的樣品添加所需的處理。
8.2以Ex / Em = 560/574 nm運(yùn)行實(shí)驗(yàn)
5.相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 貨號
鈣紅素醋酸鹽 Cat#22010
鈣黃綠素, AM Cat#22002
鈣黃綠素, AM 超純級 Cat#22003
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