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MC3T3-E Subclone 4(小鼠原成骨細胞)

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更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):3303次

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MC3T3-E Subclone 4(小鼠原成骨細胞) 培養(yǎng)細胞注意事項:

實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉0分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉MC3T3-E Subclone 4(小鼠原成骨細胞)無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實驗用品用完即應移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在抬面之無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。

小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

工作人員應注意自身之安全,須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應特別小心操作,并選擇適當?shù)燃壷疅o菌操作臺(至少ClassⅡ)。操作過程中,應避免引起aerosol之產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSOTPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。

定期檢測下列項目:5.CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培養(yǎng)箱之CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水,每周更換)。5.3.無菌操作臺內之airflow壓力,定期更換紫外線燈管及HEPA過濾膜,預濾網(wǎng)(300小時/預濾網(wǎng),3000小時/HEPA)。6.水槽可添加消毒劑(Zephrin:750),定期更換水槽的水

 粉末培養(yǎng)基配制好后(加了血清),一般在4度盡量不要超過個月,如在-20度存放時間可長一些,但也不要超過3-4個月,可能對于永生化細胞株來說要求不是太高,細胞嬌弱,放置時間不宜過長。

 開紫外線照射臺的時候,就將培養(yǎng)基、酶、DHANKS液那到室外讓它自然升溫。這樣40分鐘后,溫度也升上來了。有很多人將他放到37度水浴鍋里加熱。一定要注意水浴鍋的衛(wèi)生,有的常年不清洗,里面很臟,容易在外面瓶身上吸附大量細菌。因此用它的也一定要勤換水。從水浴鍋拿出后,找個毛巾擦干上面的水。

細胞 停滯期Stagnate phase) 細胞數(shù)量達到飽和密度后,如不及時進行傳代,細胞就會停止增殖,進入停止期。此時細胞數(shù)持平,故也稱平臺期(Plateau phase)。停滯期細胞雖不增殖,但仍有代謝活動。如不進行分離傳代,細胞會因培養(yǎng)液中營養(yǎng)耗盡、代謝產(chǎn)物積聚、pH 下降等因素中毒,出現(xiàn)形態(tài)改變,貼壁細胞會脫落,嚴重的會發(fā)生死亡,因此,應及時傳代。
公司更多產(chǎn)品信息:0307 氰鉀(KCN)培養(yǎng)基 ml×0 支/盒
0308 氰鉀(KCN)對照培養(yǎng)基 ml×0 支/盒
030 賴氨酸脫羧酶試驗 ml×0 支/盒
030 氨基酸脫羧酶試驗對照 ml×0 支/盒 生化試驗,接種后每支滴加00~300ul 0303 覆蓋
0303 無菌液體石蠟 ml×0 支/盒
0308 尿素瓊脂基礎(pH7.) 50g/瓶 用于細菌尿素酶試驗
0306 40%尿素溶液 5ml×0 支/盒 每支用于00ml 0308 中
30307 尿素瓊脂斜面(pH7.) 0 支/盒 用于細菌尿素酶試驗
008 Honda 氏產(chǎn)毒肉湯基礎 50g/瓶 用于產(chǎn)毒培養(yǎng)
009 Elek 氏培養(yǎng)基 50g/瓶 用于毒素測定
00 革蘭氏染色液 0ml×4 支/盒 用于細菌的革蘭氏染色
00 氧化酶試紙 0 片/包 用于氧化酶試驗
050 3%氯化鈉堿性蛋白胨水 50g/瓶 用于副溶血性弧菌增菌
3050 無菌3%氯化鈉堿性蛋白胨水 5ml× 瓶/箱 用于副溶血性弧菌增菌
3050 無菌3%氯化鈉堿性蛋白胨水 9ml ×0 支/盒 用于副溶血性弧菌增菌
050 TCBS 瓊脂 50g/瓶 用于副溶血性弧菌分離
30503 TCBS 瓊脂平板 90mm×0 個/包 用于副溶血性弧菌分離
0503 3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂 50g/瓶 用于副溶血性弧菌純化
30504 3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂斜面 0 支/盒 用于副溶血性弧菌血清試驗

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