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液相色譜法測(cè)定畜禽肉中*、四環(huán)素、*殘留量

2010年06月28日 13:32:15人氣:956來源:上海禾工科學(xué)儀器有限公司

1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB/T14931.1-94測(cè)定畜禽肉中*、四環(huán)素、*殘留量。zui低檢出濃度為:0.150.20,0.65mg/kg。

2.試驗(yàn)原理

  樣品經(jīng)提取,微孔濾膜過濾后直接進(jìn)樣,用反相液相色譜分離,紫外檢測(cè)器檢測(cè),與標(biāo)準(zhǔn)比較定量,出峰順序?yàn)?、四環(huán)素、*。標(biāo)準(zhǔn)加法定量。

3.試劑

3.1 乙腈分析純

3.2 0.01mol/L*溶液:稱取1.56 g±0.01g*(NaH2PH4.2H2O)溶于蒸餾水中,定容到100 mL,經(jīng)過濾器過濾(選用微孔濾膜為0.45 μm),備用。

3.3 *(OTC)標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取*0.0100g±0.0001g,用0.1mol/L鹽酸溶液每毫升含*1mg。

3.4 四環(huán)素(TC)標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取四環(huán)素0.0100g±0.001g,用0.01mol/L鹽酸溶液溶解并定容10.00 mL,此溶液每毫升含四環(huán)素1mg

3.5 *(CTC)標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取*0.0100g±0.0001g,溶于蒸餾水并定容成10.00mL,此溶液每毫升含*1mg。以上標(biāo)準(zhǔn)品均按1000單位/mg折算。3.33.5溶液應(yīng)于4以下保存,可使用1周。

3.6 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液:取3.3、3.4標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.00mL,取3.5標(biāo)準(zhǔn)溶液2.00mL,置于10mL容量瓶中,加蒸餾水至刻度。此溶液每毫升含*、四環(huán)素各0.1mg,*0.2mg,臨時(shí)現(xiàn)配。

3.7 5%高氯酸溶液。

4.儀器

4.1       液相色譜儀(HPLC):具紫外檢測(cè)器。

4.2       振蕩器:天津市恒奧科技發(fā)展有限公司

4.3       過濾器:天津市恒奧科技發(fā)展有限公司

4.4       超聲波:天津市恒奧科技發(fā)展有限公司

5.色譜條件

5.1 液相色譜柱:ODS-C18 (5 μm) 6.2mm×15 cm。

5.2 檢測(cè)波長(zhǎng):355nm。

5.3 靈敏度:0.002AUFS。

5.4 柱溫:室溫。

5.5 流速:1.0mL/min。

5.6 進(jìn)樣量:10 μL。

5.7 流動(dòng)相:乙腈/0.01mol/L*溶液30(V/V)硝酸溶液調(diào)節(jié)pH2.5),3565(V/V),使用前用超聲波脫氣10min。

6.操作方法

6.1 樣品測(cè)定:稱取5.00 g±0.01 g切碎的肉樣5 mm,置于50mL錐形燒瓶中,加入5%高氯酸25.0mL,于振蕩器上振蕩提取10min,移入到離心管中,以2000 r/min離心3min,取上清液經(jīng)0.45μm濾膜過濾,取溶液10μL進(jìn)樣,記錄峰高,從工作曲線上查得含量。

6.2 工作曲線:分別稱取7份切碎的肉樣,每份5.00 g±0.01 g,分別加入混合標(biāo)準(zhǔn)溶液025、50100、150200、250 μL(含*、四環(huán)素各為0、2.5、5.0、10.015.0、20.0、25.0 μg, 含*0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0 μg), 6.1方法操作,以峰高為縱坐標(biāo),以抗生素含量為橫坐標(biāo),繪制工作曲線。

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