按1．4節(jié)方法處置樣品后按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定。得到樣品色譜圖如圖所示。甲基對(duì)硫磷、乙基對(duì)硫磷、甲拌磷的殘留量分別為1.752.131.83mg/kg白菜中加入上述3種農(nóng)藥作為模擬蔬菜樣品。

主要應(yīng)用于糧食、蔬菜和水果上。雖然有機(jī)磷農(nóng)藥屬非耐久性農(nóng)藥， 有機(jī)磷農(nóng)藥是目前我國(guó)使用量較大的殺蟲(chóng)劑之一。但其大量使用肯定會(huì)對(duì)環(huán)境發(fā)生負(fù)面影響，對(duì)人、蓄構(gòu)成嚴(yán)重威脅．臨時(shí)食用受污染的糧食、蔬菜，導(dǎo)致癌癥、動(dòng)脈硬化、心血管病、胎兒畸形、死胎、早天、早衰等疾病的重要原因；絕大多數(shù)人食用有害蔬菜后并不馬上表示出癥狀，但毒物在人體中富集，時(shí)間長(zhǎng)了便會(huì)釀成嚴(yán)重后果。國(guó)近年來(lái)發(fā)生的農(nóng)藥中毒事故大多數(shù)集中于高毒有機(jī)磷農(nóng)藥，以對(duì)硫磷zui多，局部地區(qū)占80％左右。因此，建立有效的檢測(cè)農(nóng)副產(chǎn)品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的方法具有重要意義。有機(jī)磷農(nóng)藥的測(cè)定常采用氣相色譜法，可是大部分有機(jī)磷農(nóng)藥具有很強(qiáng)的極性和熱不穩(wěn)定性，給氣相色譜分析帶來(lái)一定的難度。本研究采用液相色譜法同時(shí)測(cè)定蔬菜中甲基對(duì)硫磷、乙基對(duì)硫磷和甲拌磷。

1實(shí)驗(yàn)局部

1．1儀器與試劑

LC-1OA 高壓溶液輸送泵和N2000色譜工作站（浙江大學(xué)智能信息工程研究所）BF2000氮?dú)獯蹈蓛x（北京八方世紀(jì)科技有限公司）FS-1電動(dòng)勻漿機(jī)（金壇市富華儀器有限公司）．試劑．甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品（99.0％，儀器．LC-1OAT液相色譜儀（日本島津公司）包括：SPD-10AVP10APVP紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器。國(guó)家農(nóng)藥質(zhì)檢中心（沈陽(yáng)）乙基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品（99.0％，天津農(nóng)藥質(zhì)檢中心）甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)品（98.0％，天津農(nóng)藥質(zhì)檢中心）甲醇（色譜純，北京化工廠）乙腈（色譜純，天津市博迪化工有限公司）實(shí)驗(yàn)用水為重蒸餾水。

1．2色譜條件

液相色譜柱為Shim-PackVP-ODS150L4．6流動(dòng)相為V甲醇：V水=8515流速為1.0mLmin．進(jìn)樣量20uL以峰面積外標(biāo)法定量。

1．3規(guī)范溶液的配制

用甲醇制成一定濃度的貯藏液，準(zhǔn)確稱取一定量的農(nóng)藥規(guī)范品。再逐級(jí)稀釋貯藏液，得質(zhì)量濃度分別為0.100.501.01.52.0mgL規(guī)范混合液。

1．4樣品處置方法

取可食部分，取1000g白菜。用干凈的紗布擦去樣品表面的附著物，采用對(duì)角線分割法，取對(duì)角部分，將其切碎．準(zhǔn)確稱取3份25g試樣，分別加入50.0mL乙腈，勻漿機(jī)中勻漿2min后用濾紙過(guò)濾，濾液收集到裝有5g氯化鈉的100mL具塞量筒中，蓋上塞子，劇烈震蕩1min靜至10min使乙腈與水相分層．將含乙腈的有機(jī)層經(jīng)盛有3g*的漏斗過(guò)濾于100mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，從中吸取10mL溶液，再用氮吹儀吹至近干后用甲醇溶解定容至5mL經(jīng)0.45&mum濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣。

2結(jié)果與討論

2．1測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

測(cè)得3種農(nóng)藥的zui大吸收波長(zhǎng)分別為甲基對(duì)硫磷265nm乙基對(duì)硫磷259nm甲拌磷為238nm．綜合考慮3種組分的zui大吸收值及靈敏度，分別將3種農(nóng)藥的規(guī)范貯藏液依次用UV一1100紫外／可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行波長(zhǎng)掃描。zui終選擇紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm

2．2流動(dòng)相組成對(duì)分離度的影響

隨著甲醇含量的增加，實(shí)驗(yàn)考察了甲醇-水的不同比例對(duì)甲基對(duì)硫磷、乙基對(duì)硫磷、甲拌磷分離的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果標(biāo)明。其分離度逐漸減小，當(dāng)甲醇：水=8515時(shí)，各組分仍能夠得到很好的分離，且分析所用的時(shí)間較短。

2．3工作曲線和檢出限

優(yōu)化的色譜條件下進(jìn)行分析，取1．3節(jié)的規(guī)范溶液。得到規(guī)范色譜圖。同一樣品平行測(cè)定5次，取其平均值，繪制工作曲線，以峰面積A對(duì)濃度cmgL回歸計(jì)算，結(jié)果標(biāo)明線性關(guān)系良好，回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢測(cè)限。

2．4精密度實(shí)驗(yàn)

上述色譜條件下，取質(zhì)量濃度為1.5mgL混合規(guī)范品。連續(xù)進(jìn)行7次測(cè)定，經(jīng)計(jì)算得到測(cè)定甲基對(duì)硫磷、乙基對(duì)硫磷、甲拌磷的精密度RSD分別為4.6％、3.2％、2.9％。

2．5回收率測(cè)定

按&ldquo1．4&rdquo節(jié)方法制備樣品液進(jìn)行測(cè)定，已知含量的白菜樣品中分別加入不同濃度的有機(jī)磷農(nóng)藥規(guī)范品?？鄢龢悠分性械霓r(nóng)藥含量，求出加標(biāo)回收率，結(jié)果可知，甲基對(duì)硫磷回收率為95.44％～98.33％；乙基對(duì)硫磷回收率為93.33％～101.67％；甲拌磷回收率為94.00％～97.78％。

2．6樣品分析