2016 02-19

DNA聚合酶及其應(yīng)用

DNA聚合酶及其應(yīng)用（一）大腸桿菌DNA聚合酶I是KornbergA.1956年首先從大腸桿菌E。Coli細(xì)胞中分離出來的。它是一種多功能性的酶，包括3種不同的酶活力：ELISA試劑盒5′→3′聚合酶...

2016 02-17

免疫熒光組織化學(xué)

免疫熒光組織化學(xué)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理，先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素，再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。在細(xì)胞或組織中形成的抗原抗體復(fù)合物上含有標(biāo)記的熒光素...

2016 02-15

B細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu)以及來源

（一）來源、分布及數(shù)量B細(xì)胞由骨髓淋巴干細(xì)胞分化為前B細(xì)胞，在骨髓微環(huán)境中發(fā)育、成熟為可識別抗原的成熟B細(xì)胞，后經(jīng)血液循環(huán)定居在外周淋巴器官。成熟B細(xì)胞可在識別抗原后，進(jìn)一步分化為能分泌免疫球蛋白的漿...

2016 02-03

蛋白質(zhì)復(fù)合物的基本流程

（一）樣品的制備在這部分內(nèi)容中，主要描述了直接收集細(xì)胞內(nèi)總蛋白的方法、用免疫沉淀獲得蛋白質(zhì)的方法，及其隨后用雙向電泳分離、用銀染或West-ern印跡檢測的樣品制備。如果采用了其他的檢測方法，如GST...

2016 02-01

淋巴細(xì)胞數(shù)量與功能檢測

淋巴細(xì)胞及其功能檢測常用于對機(jī)體免疫狀態(tài)進(jìn)行評估及對疾病療效的監(jiān)控。（一）淋巴細(xì)胞數(shù)量檢測1.T細(xì)胞數(shù)量檢測常用間接免疫熒光法，檢測T細(xì)胞表面的CD3、CD4、CD8，來了解外周血T細(xì)胞數(shù)量及亞群的變...

2016 01-29

影響臍血采集的因素

影響臍血采集的因素除了技術(shù)熟練，保證斷臍后迅速穿刺臍靜脈外，胎兒體重、胎盤大小等均影響到臍血的采集量。ELISA試劑盒1.采集時機(jī)胎兒娩出5min內(nèi)臍帶/胎盤的血流較為豐富，此時采集可增加采血量，故在...

2016 01-27

原核細(xì)胞的表達(dá)特點(diǎn)

同所有的生命過程一樣，外源基因在原核細(xì)胞中的表達(dá)包括兩個主要過程：即ＤＮＡ轉(zhuǎn)錄成ｍＲＮＡ和ｍＲＮＡ翻譯成蛋白質(zhì)。與真核細(xì)胞相比，原核細(xì)胞的表達(dá)有以下特點(diǎn)：（１）原核生物只有一種ＲＮＡ聚合酶（真核細(xì)胞有...

2016 01-25

微生物依據(jù)氮源譜的分類

凡是構(gòu)成微生物細(xì)胞的物質(zhì)或代謝產(chǎn)物中氮元素來源的營養(yǎng)物質(zhì)，稱為氮源。細(xì)胞干物質(zhì)中氮的含量僅次于碳和氧。氮是組成核酸和蛋白質(zhì)的重要元素，氮對微生物的生長發(fā)育有著重要作用。從分子態(tài)的N2到復(fù)雜的含氮化合物...

2016 01-22

遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能

隨著遺傳學(xué)的發(fā)展，遺傳物質(zhì)的特點(diǎn)不斷被認(rèn)識：①它必須攜有生物的各種遺傳信息；②它必須能夠地復(fù)制，這樣才能穩(wěn)定地傳遞遺傳信息；③它必須能夠變異，如果沒有變異．生物就不能改變和適應(yīng)，進(jìn)化也不會發(fā)生。189...

2016 01-20

溫敏突變株的篩選方法

溫度敏感突變株(簡稱溫敏突變株，Ts突變株)是一種條件致死突變株，它們在許可溫度下能正常生長，在非許可溫度下不能生長。溫敏突變株主要由必需基因突變引起，也可由非必需基因突變產(chǎn)生。由后者形成的Ts突變株...

2016 01-18

星形膠質(zhì)的培養(yǎng)

星形膠質(zhì)的培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)揮著多種作用，組成血腦脊液屏障，營養(yǎng)和支持神經(jīng)元，與神經(jīng)元突觸的發(fā)生有著密切。1．材料(1)材料來源：新生1周內(nèi)大鼠的腦組織。(2)手術(shù)器械：解剖剪、解剖鑷...

2016 01-15

小鼠ELISA試劑盒檢測試驗(yàn)技術(shù)

ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。濃縮：由于凈化過程中引入的溶劑，可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析，需要...

2016 01-13

細(xì)胞常見問題

細(xì)胞常見問題1.血清中可能出現(xiàn)的沉淀物是什么？基于多年的實(shí)驗(yàn)研究，用于細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清以及其它血清中可能會存在以下種類的沉淀物：（1）纖維蛋白，它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物，可以達(dá)到1-2mm，可以用...

2016 01-11

酵母菌的雜交

酵母菌是單細(xì)胞的真核微生物。酵母菌的有性繁殖是通過形成單倍體的子囊孢子的方式進(jìn)行的。酵母菌存在單倍體和二倍體的生活史，具有孟德爾式的分離現(xiàn)象，以及a和a接合型．具有這兩種接合型的子囊孢子萌發(fā)生長成單倍...

2016 01-08

初代細(xì)胞培養(yǎng)的傳代

(一)貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的換液)初代培養(yǎng)成功，由于營養(yǎng)缺乏，代謝產(chǎn)物增多，細(xì)胞未達(dá)到飽和密度，仍需繼續(xù)培養(yǎng)，因此，需采取換液方式來更新營養(yǎng)成分以滿足細(xì)胞繼續(xù)生長繁殖的需要。其換液方法比較簡單．即...

2016 01-06

顯示染色體的檢測方法

(一)原理顯示染色體主要是顯示分裂中期細(xì)胞。因細(xì)胞分裂處于中期時，染色體的長短和大小恰到好處，是研究染色體的階段。所以，*需要獲得多量的中期分裂象；第二·人類染色體有46條，密集在細(xì)胞中，相互交錯纏繞...

2016 01-04

小鼠腹腔巨噬細(xì)胞

人巨噬細(xì)胞可從外周血或經(jīng)斑蝥激發(fā)的皮皰液中獲取，也可從肺灌洗液或患者*中分離，但操作煩瑣，得量不多。許多實(shí)驗(yàn)室在進(jìn)行基礎(chǔ)或配合臨床研究巨噬細(xì)胞功能及其與疾病的關(guān)系、或篩檢免疫增強(qiáng)藥物和探討其作用機(jī)制時...

2015 12-31

葡萄糖在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)

(一)試驗(yàn)原理葡萄糖在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)包括細(xì)胞膜、胰島素受體和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體等。胰島素和某些降血糖藥對該系統(tǒng)具有激活作用，可促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)，從而調(diào)節(jié)糖代謝。本實(shí)驗(yàn)通過離體睹肪細(xì)胞與2一脫氧一3H一葡萄...

2015 12-28

程序外DNA合成實(shí)驗(yàn)

在正常的細(xì)胞有絲分裂過程中，僅S期是DNA合成期。當(dāng)DNA受到損傷時，損傷修復(fù)的DNA合成主要發(fā)生在其他細(xì)胞周期，稱非程序性DNA合成，又稱程序外DNA合成(unsched，aledDNAsynthe...

2015 12-25

0．25％*的配制方法

1)訓(xùn)練目的掌握0．25％*的配制方法和無菌處理方法。2)實(shí)驗(yàn)原理0．25％*常用來離散組織獲得單個細(xì)胞，或者消化需要傳代的貼壁細(xì)胞。培養(yǎng)基則為細(xì)胞生長提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)，是細(xì)胞賴以生存的重要支持物，...