| 上海宇淳生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： PCR八聯(lián)排管,sigma現(xiàn)貨,Cy7試劑 |
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| 參考價(jià) | ￥580 |
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型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷(xiāo)商 -
所在地
上海市
| 24T | 580元 | 1 盒 可售 |
更新時(shí)間：2024-06-06 10:53:04瀏覽次數(shù)：357
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土壤硝酸還原酶(S-NR)試劑盒
土壤硝酸還原酶(S-NR)試劑盒
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤硝酸還原酶（Solid-Nitrate Reductase，S-NR）試劑盒說(shuō)明書(shū) (貨號(hào)：WS9030F 分光法 24 樣) 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 土壤硝酸還原酶可以把土壤中的硝酸鹽轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛猁}，然后再通過(guò)亞硝酸還原酶的作用 轉(zhuǎn)變成氮循環(huán)的重要原料-銨，從而調(diào)節(jié)氮代謝，并影響到光合碳代謝，進(jìn)而影響植物生長(zhǎng)。 本試劑盒提供一種快速、精確的測(cè)定方法，土壤硝酸還原酶催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽； 同時(shí)抑制亞硝酸還原酶對(duì)產(chǎn)生的亞硝酸鹽的降解，亞硝酸鹽與對(duì)應(yīng)的顯色劑反應(yīng)生成（粉） 紅色偶氮化合物；該物質(zhì)在 540nm 有吸收峰，進(jìn)而得出土壤硝酸還原酶的活性。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱(chēng) 規(guī)格試劑名稱(chēng) 保存要求 備注 試劑一 液體 15mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 液體 3mL×1 瓶 4℃保存 試劑三 液體 30mL×1 瓶 4℃保存 試劑四 液體 14mL×1 瓶 4℃保存 試劑五 A 液 12mL×1 瓶 4℃保存 臨用前，可依據(jù)待檢測(cè)樣本數(shù)量， 把A液和B液等比例混合成無(wú)色的 反應(yīng) mix（注意觀察，若變粉色， 則不能使用）。 兩天之內(nèi)用完。 B 液 12mL×1 瓶 標(biāo)準(zhǔn)品 粉體 mg×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑 三、所需的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器。 四、土壤硝酸還原酶（S-NR）的測(cè)定： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備 取新鮮土樣風(fēng)干或者 37 度烘箱風(fēng)干，先粗研磨，過(guò) 40 目篩網(wǎng)，備用。 【注】：土壤風(fēng)干，減少土壤中水分對(duì)于實(shí)驗(yàn)的干擾；土壤過(guò)篩，保證取樣的均勻細(xì)膩； 2、測(cè)定步驟 ① 可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 540nm，蒸餾水調(diào)零。 ② 在 1mLEP 管中依次加入： 試劑名稱(chēng)（μL） 測(cè)定管 對(duì)照管 風(fēng)干土樣（g） 0.25 0.25 試劑一 200 200 試劑二 50 50 蒸餾水 250 250 混勻，且務(wù)*用封口膜封 口。25℃培養(yǎng) 24h 混勻，且務(wù)*用封口膜封口。-20℃培 養(yǎng) 24h（可放在-20℃冰箱） 試劑三 500 500 混勻，12000rpm，4℃離心 10min，上清液待用本試劑盒僅供科研使用 2 ③ 顯色反應(yīng)，在 EP 管中依次加入： 上清液 160 160 試劑四 240 240 反應(yīng) mix 400 400 混勻，25℃反應(yīng) 5min（準(zhǔn)確時(shí)間），全部液體轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃 比色皿（光徑 1cm）中，立即于 540nm 處讀取 A 值，△A=A 測(cè) 定-A 對(duì)照（每個(gè)樣本做一個(gè)自身對(duì)照管）。 【注】：若△A 值低于 0.01，可增加③ 步中上清液的體積（如由 160μL 增至 300μL，則試劑四減至 100μL， 保持總體積仍為 800μL）。 五、結(jié)果計(jì)算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y = 6.5179x - 0.0065；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmoL/mL），y 為吸光值△A。 2、單位定義：每天每克土樣中產(chǎn)生 1μmoL 的 NO2 ˉ的量為一個(gè) 酶活力單位。 S-NR(μmoL/d/g 干土)=[(△A+0.0065)÷6.5179×V1]÷W÷T =0.153×(△A+0.0065)÷W 3、單位定義：每天每克土樣中產(chǎn)生 1μg NO2 ˉ的量為一個(gè)酶活力單位。 S-NR(μg/d/g 干土)=[(△A+0.0065)÷6.5179×V1]÷W÷T×46 =7.06×(△A+0.0078)÷W V1----反應(yīng)體系總體積，1mL； T----反應(yīng)時(shí)間，24h=1d； W----樣本實(shí)際質(zhì)量，g； 標(biāo)準(zhǔn)品的分子量---69； NO2 -的分子量---46。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（100μmol/mL）：把標(biāo)準(zhǔn)品*全溶解于 1mL 蒸餾水中（母液需在兩 天內(nèi)用且-20℃保存）。 2 把母液用蒸餾水稀釋成六個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.04, 0.08, 0.12, 0.16, 0.2. μmol/mL。 也可根據(jù)實(shí)際樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 依據(jù)顯色反應(yīng)階段的測(cè)定管的加樣順序操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
