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尿素含量測定試劑盒(二乙酰一肟法)
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【簡單介紹】
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尿素含量測定試劑盒(二乙酰一肟法)
在加熱和強酸條件下,尿素與二乙酰一肟及安*比林反應(yīng)呈黃色,在波長460 nm 處有特征吸收峰。

尿素含量測定試劑盒(二乙酰一肟法)

尿素含量測定試劑盒(二乙酰一肟法)

本試劑盒僅供科研使用 1 尿素含量(二乙酰一肟法)檢測試劑盒說明書 (貨號:WS1440F 分光法 48 樣) 一、產(chǎn)品簡介: 在加熱和強酸條件下,尿素與二乙酰一肟及安*比林反應(yīng)呈黃色,在波長460 nm 處有特征吸收峰。通過檢測 生成的黃色物質(zhì)在460nm處的增加量進(jìn)而得出樣本中尿素含量。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體2.5mL×14℃保存 試劑二 粉體 mg×1 4℃保存 臨用前甩幾下使粉體落入底部,先加 2.8mL 蒸餾水溶解,再緩慢加 2.8mL 磷酸混勻,最 后再加 5.6mL 硫酸混勻,冷卻至室溫備用。 標(biāo)準(zhǔn)管 粉體 mg×2 4℃保存 臨用前每支加1mL蒸餾水溶解4mg/mL,再 用蒸餾水稀釋40倍(1:39)成0.1mg/mL三、所需儀器和用品: 可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、天平、移液器、離心機、蒸餾水。 四、尿素含量檢測: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗樣本和試劑浪費! 1、樣本制備: 0.1g 組織樣本,加 1mL 的蒸餾水研磨,超聲萃取 10min 后定容至 1mL,室溫靜置 30min,12000rpm,常溫 離心 10min,上清液待測。 2、上機檢測: 1 可見分光光度計預(yù)熱 30min,設(shè)置溫度在 37℃,設(shè)定波長到 460nm。 2 做實驗前選取 2 個樣本,找出適合本次檢測樣本的稀釋倍數(shù) D。 3 所有試劑解凍至室溫,在 EP 管依次加入: 試劑名稱(μL測定管 對照管 空白管 (僅做一次) 標(biāo)準(zhǔn)管 (僅做一次) 樣本 100 100 蒸餾水 50 100 標(biāo)準(zhǔn)品 100 試劑一 50 50 50 試劑二 100 100 100 100 混勻,95℃沸水浴反應(yīng) 20min 蒸餾水 500 500 500 500 混勻,(若渾濁則 5000rpm 室溫離心 5min 后取上清液測定)取 700μL 1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)中,于 460nm 處讀吸光值 A,△A=A 測定-A 對照。 【注】:測定管的 A 值若超過 1.5,可把樣本再進(jìn)行稀釋,稀釋倍數(shù) D 代入計算公式。 五、結(jié)果計算: 1、按照組織質(zhì)量計算: 尿素含量(mg/g)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×△A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷(V1÷V×W)×D=0.1×△A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷W×D 尿素含量(mg/kg)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×103×△A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷(V1÷V×W)×D=100×△A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷W×D C 標(biāo)準(zhǔn)---尿素標(biāo)品濃度,0.1mg/mLD---稀釋倍數(shù),未稀釋即為 1; 60.04---尿素分子量; W---取樣質(zhì)量,gV---提取液體積,1mL; V1---加入樣本體積,0.1mL



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