| 上海宇淳生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： PCR八聯(lián)排管,sigma現(xiàn)貨,Cy7試劑 |
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| 參考價(jià) | ￥190 |
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型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷(xiāo)商 -
所在地
上海市
| 48T | 190元 | 1 盒 可售 |
更新時(shí)間：2024-06-13 16:56:04瀏覽次數(shù)：268
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糖原含量試劑盒(硫酸-蒽酮比色法)
本試劑盒僅供科研使用 1 糖原含量測(cè)定說(shuō)明書(shū) （貨號(hào)：WS1650F 分光法 48 樣） 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 糖原是由葡萄糖分子通過(guò)糖苷鍵聚合而成的高分子物質(zhì)，作為重要的能源物質(zhì)儲(chǔ)存于肝 臟、肌肉和腦等重要器官。糖原的儲(chǔ)存或代謝異?？梢鸲喾N疾病，因此測(cè)定糖原含量的 變化，對(duì)研究糖原代謝及相關(guān)疾病有著重要的意義。 采用蒽酮法：即利用強(qiáng)堿性提取液提取糖原，濃硫酸是糖原脫水生產(chǎn)糖醛衍生物，糖醛 類(lèi)與蒽酮作用，在 620nm 處有吸收峰，再與相同方法處理的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液比色定量。 二、試劑盒的組成和配制： 三、所需的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、水浴鍋、可調(diào)式移液器、濃硫酸（不 允許快遞）和蒸餾水。 四、糖原含量檢測(cè)： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、檢測(cè)液制備： 按照肝臟/肌肉樣本質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：3 的比例加入提取液（如取 0.1g 組織，加 0.3mL 提取液），蓋緊管蓋（用封口膜封口）95℃水解 20min，室溫冷卻 后即為糖原水解液。 ①肝糖原檢測(cè)液：在冷卻后的糖原水解液 EP 管中加入 0.7mL 蒸餾水混勻總體積約 1mL， 8000rpm 室溫離心 5min，取上清液 100μL 至新 EP 管中，再加 900μL 蒸餾水即上清 液稀釋 10 倍后作為檢測(cè)液測(cè)定。 ②肌糖原檢測(cè)液：在冷卻后的糖原水解液 EP 管中加入 0.7mL 蒸餾水混勻總體積約 1mL， 8000rpm 室溫離心 5min，取上清液 200μL 至新 EP 管中，再加 200μL 蒸餾水即上清 液稀釋 2 倍后作為檢測(cè)液測(cè)定。 ③糖原含量低的組織樣本：在冷卻后的糖原水解液 EP 管中加入 0.7mL 蒸餾水混勻總體 積約 1mL，8000rpm 室溫離心 5min，取上清液作為檢測(cè)液測(cè)定。 2、上機(jī)檢測(cè)： ① 可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 620nm，蒸餾水調(diào)零。 ② 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱(chēng) 規(guī)格 保存要求 備注 提取液 液體 15mL×1 瓶 4℃保存 試劑一 粉劑 mg×2 瓶 4℃保存 用前每瓶甩幾下使粉劑落入底部，再加 15mL 濃硫酸，充分溶解混勻后使用；用 不完的試劑 4℃保存 4-5 天。 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑 mg×1 支 4℃保存 從標(biāo)準(zhǔn)管中稱(chēng)量取出 2mg 至一新 EP 管 中，再加 2mL 蒸餾水溶解即 1mg/mL 的 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液，再稀釋 50 倍即 0.02mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)品備用。本試劑盒僅供科研使用 2 【注】若 A 測(cè)定管值在零附近，可以增加測(cè)定管上樣量 V 檢測(cè)液（如增至 60μL），蒸 餾水相應(yīng)減少，則改變后的 V 檢測(cè)液代入計(jì)算公式計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算： 糖原含量(mg/g)=(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×(C 標(biāo)準(zhǔn)×V 標(biāo))×D÷(V 檢測(cè)液÷V×W)÷1.11 =0.0054×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白) ×D÷(V 檢測(cè)液÷V×W) V 標(biāo)---0.3mL； V 檢測(cè)液---0.03mL； W---取樣量，g； V---提取液總體積，1mL； C 標(biāo)準(zhǔn)---標(biāo)準(zhǔn)品濃度，0.02mg/mL； D---樣本測(cè)試前稀釋倍數(shù)，肝糖原 D 值為 10，肌糖原 D 值為 2； 1.11---是此法測(cè)得葡萄糖含量換算為糖原含量的常數(shù)。 試劑名稱(chēng) （μL） 空白管 （只做一次） 標(biāo)準(zhǔn)管 （只做一次） 測(cè)定管 蒸餾水 300 270 標(biāo)準(zhǔn)液 300 檢測(cè)液 30 試劑一 600 600 600 混勻，置 95℃水浴 5min（蓋緊用封口膜封口，防止水分散失）， 冷卻后轉(zhuǎn)移至 1mL 比色皿中，于 620nm 處讀取吸光值 A。糖原含量試劑盒(硫酸-蒽酮比色法)
