免疫原

klh偶聯(lián)合成肽來(lái)源于植物、海藻線粒體f型ATP合酶β亞基序列，包括擬南芥ATP合酶亞基β -1 UniProt:P83483, TAIR:AT5G08670

ATP合成酶亞基β -2 UniProt:P83484, TAIR: AT5G08690, ATP酶亞基β -3, UniProt: Q9C5A9, TAIR:AT5G08680，屬于線粒體呼吸鏈復(fù)合體I。

主機(jī)的兔子

單克隆多克隆

純度血清

格式凍干

量50µl

重建時(shí)加入無(wú)菌水50µl

凍干/復(fù)配保存于-20°C;一旦重組，使公平，以避免重復(fù)凍融循環(huán)，請(qǐng)記住，在打開(kāi)之前，旋轉(zhuǎn)管短暫，以避免任何損失，凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側(cè)

Western blot (WB)

推薦稀釋1:1 . 1000 1:1 . 5000 (WB)

預(yù)計(jì)|明顯MW 59,6 | 55 kDa

椰菜(Brassica oleracea var. botrytis cv.)線粒體蛋白10、20 μ g。按照Rurek等人的描述，2015年(doi: 10.1016/j.bbabio.2015.01.005)分離的“Diadom"凝乳(花序)用標(biāo)準(zhǔn)樣品緩沖液變性(樣品中的最終濃度:2% SDS、10%甘油,50 mM Tris-HCl pH值6.8,0.1%溴酚藍(lán),1% b-mercaptoethanol)在80 oc 10分鐘。蛋白質(zhì)12% SDS - page分離和涂抹1 h Immobilon-P(微孔)使用標(biāo)準(zhǔn)Towbin緩沖區(qū)(25毫米三,192毫米ganansuanpH值8.3,20%甲醇)補(bǔ)充與SDS(0.1%)和半干轉(zhuǎn)移裝置(TE77壓水式反應(yīng)堆,Hoefer)。對(duì)印跡進(jìn)行CBB R250短暫染色(CBB溶解在50%甲醇，7%乙酸中)，染色(使用該溶液不含CBB)和濕掃描(Laser Jet Pro 400彩色MFP掃描儀，惠普)。用5%脫脂牛奶(溶解在含0.1%吐溫20的PBS-T中)孵育1h, RT攪拌阻斷印跡。將印跡在一抗中稀釋1:10 00孵育過(guò)夜(15小時(shí))，在+4oC, PBS-T攪拌。倒出抗體溶液，簡(jiǎn)單沖洗印跡，然后在RT下用大量PBS-T攪拌洗滌3次10分鐘。用二抗(抗兔IgG，馬蘿卜過(guò)氧化物酶標(biāo)記，來(lái)自Agrisera;產(chǎn)品# AS09 602)在2%的牛奶/ PBS-T中稀釋到1:30 000，室溫下攪拌1h。像上面那樣洗滌印跡，用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑顯影1分鐘。曝光時(shí)間分別為:10秒、20秒、30秒和1分鐘，如圖所示。MW標(biāo)記:PageRuler Plus(產(chǎn)品#26619)Thermo Scientific(在西方圖像上的點(diǎn)在面板的左側(cè))。紅色地段15d3650，藍(lán)色地段16d2201。