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抗體由于性質(zhì)和所使用的儲(chǔ)存條件等各有不同,其保質(zhì)期可能從幾周到幾年??贵w能否正確保存,直接決定了抗體的活性和使用效果。每個(gè)抗體有其*的保存最佳條件,但我們依然可以總結(jié)抗體保存的一般準(zhǔn)則以及一些注意事項(xiàng)??贵w必須存放在適當(dāng)?shù)臏囟群蚿H值范圍。為了維持蛋白質(zhì)的活性,以及防止其聚集,經(jīng)常保存在一定濃度的甘油,蔗糖,或類(lèi)似的物質(zhì)里面。如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。
1、多克隆抗體
多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而,一旦抗體被純化后,儲(chǔ)存在50%的甘油中于-20℃保存,即使沒(méi)有凍融,其活性的損失也可以觀察到,盡管其進(jìn)程仍然非常緩慢。即使沒(méi)有甘油,只要你不經(jīng)常凍融,抗體也可以存儲(chǔ)在-20℃幾年甚至幾十年。此外,該抗體濃度應(yīng)高于1mg/ml,因?yàn)橄〉目贵w容易失去活性而且容易造成物理吸附導(dǎo)致的損失。
2、單克隆抗體
單克隆抗體可以加入50%的甘油存放于-20℃。也可4℃或-20℃保存于飽和硫酸銨中。一般不會(huì)出現(xiàn)失活、細(xì)菌滋生以及氧化等現(xiàn)象。而凍干法(冷凍干燥,干燥或從冰凍狀態(tài))為一些冰凍以后不穩(wěn)定抗體提供了一種替代的保存方法。在大多數(shù)情況下,凍干的抗體最好是存放在-20℃。但凍干法需要昂貴的設(shè)備和勞動(dòng)力。
3、特殊抗體(帶標(biāo)記的抗體)
帶標(biāo)記的抗體一般儲(chǔ)存在黑色容器中或者用錫箔紙包裹。
(1)、酶標(biāo)記抗體
堿性磷酸酶和其他酶結(jié)合物對(duì)于冷凍特別敏感,一般應(yīng)在4°C短期存儲(chǔ)。標(biāo)記抗體長(zhǎng)期保存最好是在終濃度為50%的甘油或乙二醇中于-20°C保存。雖然某些酶結(jié)合物可在無(wú)保護(hù)劑的情況下于-20°C儲(chǔ)存,但必須分裝,以防止反復(fù)凍融。 (2)、熒光標(biāo)記抗體
偶聯(lián)抗體需要在棕色管中或使用錫箔紙避光4℃保存。尤其是熒光抗體,對(duì)光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的!
(3)、IgG3 同型對(duì)照抗體
永遠(yuǎn)保存在4℃,是為了避免凍融造成抗體變性形成多聚體
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