2015 08-03

網狀纖維染色－Wider染色法

網狀纖維染色－Wider染色法：可以用來顯示病變組織網狀支架的破壞情況。特別是在腫瘤病理診斷中，網狀纖維染色對于鑒別來源于上皮組織和間葉組織的惡性腫瘤具有重要價值。細胞染色步驟：①組織切片脫蠟至水。1...

2015 07-31

使用濃度對熒光PCR結果的影響

使用濃度對熒光PCR結果的影響：ELISA試劑盒SYBRGreenI的使用濃度是影響實驗成功與否的關鍵因素，如果SYBRGreenI的濃度不飽和會使熒光信號不能反應產物量的變化。而過高濃度則會抑制PC...

2015 07-27

免疫熒光組織化學的檢查方法

檢查抗原法：此法是免疫組織化學zui早使用的方法，用熒光素標記已知特異性抗體，直接與組織細胞中相應抗原結合，在熒光顯微鏡下可見抗原存在部位呈現(xiàn)特異性熒光。此法特異性強，快速而簡便，但是，由于一種熒光抗...

2015 07-24

非特異性熒光染色的消除

組織的非特異性熒光染色機制很復雜，其產生的原因主要有：一部分熒光素末與蛋白質結合，形成了聚合物和衍化物，不能被除去；抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白與組織成分結合；除被檢抗原以外，組織中...

2015 07-22

原位雜交組織化學探針對照

已知陽性組織和已知陰性組織對照用探針在已知含靶核酸序列的陽性組織和已知不含靶核酸序列的陰性組織標本上進行原位雜交，應分別得到陽性結果和陰性結果。如果已知陽性組織出現(xiàn)陰性結果，則應對探針的制備及原位雜交...

2015 07-20

原位雜交組織切片技術

冰凍切片在原位雜交中以冰凍切片zui常用。切片時，要盡量避免RNA酶污染，操作時需戴手套，使用70％酒精擦洗工作臺、切片機刀架、搖柄和載物臺等手常接觸的部位以及其他器械。切片厚度可根據具體情況而定。如...

2015 07-17

膠體金標抗體的染色方法

利用兩種不同直徑的膠體金顆粒標記兩種第二抗體，在電鏡下進行兩種不同抗原的亞細胞定位。基本原則：首先需購買擬研究的兩種抗原的特異性抗體，以及不同直徑金顆粒標記的相應第二抗體，然后在同一張載網上分別或同時...

2015 07-15

間接免疫熒光法操作步驟

間接法又稱為熒光抗-抗體法?需要兩種抗體參與，即一抗和二抗(熒光素標記)。一抗對標本中的抗原來說起抗體的作用，但對熒光標記的二抗來說又起著抗原作用。–可用來檢測標本中未知抗原，也可檢測血清中未知抗體。...

2015 07-13

熒光抗體染色間接法

間接法（1）切片固定后用毛細滴管吸取經適當稀釋的免疫血清滴加在其上，置于染色盒中保持一定的濕度，37℃作用30min。然后用0.01mol/lpH7.2PBS洗兩次，10min，用吸水吸去或吹干余留的...

2015 07-10

抗原與抗體的結合作用

抗原與抗體的結合作用抗體（Ab）和抗原(Ag)的交互作用與經典的質量動力反應學描述的雙分子反應相似：[Ag]+[Ab]游離抗原和游離抗體可逆地反應形成抗原-抗體復合物。重排等式可以得到一個親和力（平衡...

2015 07-08

免疫組化非特異性染色的問題解決

①是否有效地去除了內源性酶和*。應注意的是，并不是每一種組織均需要進行此步驟，但對于內源性酶或*豐富的組織，如肝臟、腎臟等，需考慮此原因。處理的方法為：滅活堿性磷酸酶：zui常用的方法是將左旋咪唑（2...

2015 07-06

免疫組化的結果分析

DAB顯色時間如何把握？1.DAB顯色時間不是固定的，主要由顯微鏡下控制顯色時間，到出現(xiàn)淺棕色本底時即可沖洗。2.DAB顯色時間很短（如幾秒或幾十秒）就出現(xiàn)很深的棕褐色，這很可能說明你的抗體濃度過高或...

2015 07-03

環(huán)境條件影響*活性強弱的實驗步驟

實驗步驟1.*的提取取已發(fā)芽的水稻或小麥種子（幼芽長3～4cm）20粒，放在研缽中研磨，勻漿用100ml水分多次沖洗，集中于150ml三角瓶并充分攪拌、靜置1小時后，過濾入另一三角瓶，濾液中即含有*，...

2015 07-01

寡核苷酸與抗體的結合

寡核苷酸與抗體的結合連接用的抗體可以是特異性一抗，也可以是第二抗體或其他的連接二抗，如抗（Dig）、抗熒光素（FITC）或抗*（biotin）二抗。1．抗體的脫鹽和活化首先對抗體免疫球蛋白進行脫鹽，然...

2015 06-29

培養(yǎng)基的質量要求

對每一個批次產品取適量樣品進行微生物污染的測試。按批量的不同選擇適量的培養(yǎng)基在適當條件下培養(yǎng)，測定其微生物污染。生產商應根據每種平板或液體培養(yǎng)基的數(shù)量，規(guī)定或建立其污染限值，并記錄培養(yǎng)基成分、制備要素...

2015 06-26

ELISA常見問題及處理對策

可能原因解決方法ELISA試劑孵育的時間沒有按說明書操作確定*化抗體，連接的HRP試劑或鏈霉親和素-HRP使用的時間是否適當。不同試劑盒或不同批號的試劑混用重新檢查試劑的標簽，確認所有組分都屬于正使用...

2015 06-24

病理學展片與脫蠟技術

展片與撈片展片水溫應在42℃至47℃之間，這主要和包埋蠟的熔點有關,水溫過高，會引起組織細胞散開，水溫過低，切片皺摺無法攤平。包埋蠟中如有二甲苯，也會造成石蠟溶解現(xiàn)象。而用一次性刀片切的片子，一碰到熱...

2015 06-19

建立細胞系（或株）的要求

什么樣的體外培養(yǎng)群可被認可為己鑒定的細胞，視具體情況而定，無統(tǒng)一規(guī)定。對于用作原代培養(yǎng)的細胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長期培養(yǎng)，特別是反復傳代的細胞，常需做如下說明：1、組...

2015 06-17

曲霉素ELISA試劑盒產品特點

曲霉素ELISA試劑盒產品特點●快速——只需要20分鐘●檢測范圍：2.0--100ng/ml（ppb）●可半定量和定量分析●可分析單個樣品，也可成批分析樣品（用于更經濟的檢測）●操作簡便易處理，作用效...

2015 06-16

ELISA試劑盒標本的采取和保存

標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。大部...